云南野鸟源H9N2亚型AIV的遗传进化分析

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第11期北京时间：

作者：杨佳, 杨钦鸿, 王位, 张永仙, 代红炀, 尹红斌, 李素华

单位：1. 西南林业大学生物与食品工程学院, 昆明 650224;2. 云南省动物卫生监督所, 昆明 650051;3. 会泽黑颈鹤国家级自然保护区管护局, 曲靖 654200

摘要：【目的】 分析云南纳帕海国际重要湿地H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus，AIV)的遗传进化和分子特征，掌握H9N2亚型AIV在野禽中的流行特点，为禽流感疫情防控提供数据支持。【方法】 采集2022―2023年云南省香格里拉纳帕海国际重要湿地野禽粪样及其周边家禽喉头、泄殖腔和环境水样，经尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚分离病毒，结合HA试验和RT-PCR扩增鉴定AIV亚型。利用MBTuni-12/13引物同时扩增H9N2亚型AIV毒株的8个基因(HA、NA、M、PB2、NS、NP、PA及PB1)节段，利用二代测序获取全基因组序列，并分析遗传进化关系及关键氨基酸突变位点。【结果】 分离到的4株野鸟源H9N2亚型AIV的HA、NA基因源自Y280-like亚系，M、PB2基因为G1-like亚系，NS、NP、PA、PB1基因为F/98-like亚系，表明4株分离株为多种亚型的重组毒株，重组模式与2013年以后在中国流行的G57基因型一致。序列相似性分析结果显示，4株H9N2亚型AIV分离株内部基因与H7N9、H5N6、H5N2等亚型AIV相似性较高，遗传多样性特征突出。HA蛋白裂解位点均符合低致病性禽流感特征，获得了多个可增加跨种感染风险及与哺乳动物致病力增强相关的氨基酸突变位点，包括A198T、Q234L、N166D(HA)，I292V、A558V(PB2)，I368V、L13P(PB1)，N30D、T215A(M1)，以及P42S(NS1)等。4株野鸟源H9N2亚型AIV毒株具有家禽源同亚型毒株特征，野禽源AIV可能源于家禽。【结论】 从云南纳帕海国际重要湿地分离到的4株野鸟源H9N2亚型AIV可能是由家禽传播的多源重配病毒，属于G57基因型，且具有多个适应哺乳动物宿主相关的氨基酸突变位点。

关键词：野鸟;H9N2亚型禽流感病毒;G57基因型

基金资助：大型畜禽养殖场废弃物无害化处理与高效利用研究与应用(202302AE090009);云南国际性高原湿地迁徙型涉禽禽流感等动物疫病监测研究(1963037)