Ola1对小鼠早期胚胎体外发育的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第11期北京时间：

作者：罗安凤, 张玉清, 王昕昕, 杨彩侠, 解迪

单位：1. 长江大学动物科学技术学院, 荆州 434025;2. 中国人民解放军中部战区总医院生殖医学科, 武汉 430060

摘要：【目的】 探究Obg样ATP酶1(Obg-like ATPase 1，Ola1)对小鼠早期胚胎发育的影响。【方法】 采用体外受精技术获取小鼠合子并进行胚胎体外发育培养，利用电转siRNA干扰技术敲低Ola1基因，检测Ola1基因干扰效率，并统计卵裂率和囊胚率；通过免疫荧光和TUNEL法检测胚胎的DNA损伤情况和早期凋亡情况；利用实时荧光定量PCR检测胚胎多能性和凋亡相关基因的转录水平。【结果】 与对照组相比，敲低Ola1基因后，小鼠胚胎中Ola1基因相对表达量极显著降低(P＜0.01)，成功实现小鼠胚胎中敲低Ola1基因表达。敲低Ola1基因后，早期胚胎卵裂率与对照组相比无显著差异(P＞0.05)，但囊胚率极显著低于对照组(P＜0.01)，γ-H2A.X荧光强度和囊胚凋亡率极显著高于对照组(P＜0.01)，表明敲低Ola1基因引起早期胚胎体外发育受阻。实时荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，敲低Ola1基因后，早期胚胎的多能性相关基因性别决定区Y框蛋白2(SOX2)和多潜能性基因(Nanog)表达量极显著降低(P＜0.01)，促凋亡基因B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase3)表达量显著或极显著上调(P＜0.05；P＜0.01)，抗凋亡基因B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达量极显著下调(P＜0.05)。【结论】 Ola1可能通过调控早期胚胎的多能性相关基因表达，参与DNA损伤和早期胚胎凋亡过程，从而影响早期胚胎发育潜力。

关键词：Ola1;小鼠;胚胎发育;DNA损伤;细胞凋亡

基金资助：湖北省自然科学基金面上项目(2023AFB979)