鸡源金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2024年第12期北京时间：

作者：谢常红, 刘桂兰, 王颖, 任建乐, 牛胜, 赵宇军, 范瑞文, 田文霞

单位：山西农业大学动物医学学院, 太谷 030801

摘要：【目的】 2023年4月山西太原某肉鸡场发生雏鸡精神沉郁、食欲不振、发病急、病程短、死亡率高的现象，试验旨在确定病死鸡病原菌感染情况并对其生物学特性进行研究，以期为该地区细菌感染疾病的防治提供参考依据。【方法】 对病死雏鸡进行病理剖检观察，采用平板划线法将病死鸡心脏、肝脏、脾脏组织在无菌环境下接种于BHI琼脂培养基进行细菌分离培养，利用革兰染色观察分离株形态；通过生化特性鉴定、16S rRNA基因扩增测序、细菌特异性引物PCR扩增鉴定细菌种属，应用Mega 11.0软件构建系统进化树；通过药敏试验检测分离株对常见抗菌药物的敏感性，同时对其进行致病性分析。【结果】 病死鸡剖检可见皮下水肿且有渗出液，心脏、肝脏、脾脏、胸肌有出血点。分离纯化获得12株分离株，其中8株在血琼脂培养基上出现明显的溶血现象，在麦康凯琼脂培养基不生长，革兰染色为紫色；3株在麦康凯琼脂培养基呈紫红色菌落且革兰染色为红色；1株呈透明白色菌落，革兰染色为红色。生化鉴定结果显示，分离株生化特性分别与金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌相符。8株分离株血浆凝固酶试验结果阳性，4株为阴性。16S rRNA基因PCR扩增测序结果显示，分离株分别与GenBank中的金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌的相似性达98%以上，分别命名为SA-1～SA-8、E1～E3、P1。细菌特异性基因PCR鉴定结果显示，在280、414、509 bp处出现单一明亮条带，与预期相符。药敏试验结果显示，分离株SA-1～SA-8对亚胺培南、米诺环素、头孢他啶均敏感，E1～E3对氟苯尼考、亚胺培南、米诺环素等敏感，P1对亚胺培南、庆大霉素、阿米卡星、氨苄西林等敏感。致病性试验结果显示，雏鸡单独感染以及混合感染3种分离菌，20 h内全部死亡，分离株均有较强的致病性。【结论】 本研究成功分离获得8株鸡金黄色葡萄球菌、3株大肠杆菌、1株奇异变形杆菌，分离株均表现多重耐药，对雏鸡有较强致病性。研究结果为研究金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌的混合感染致病机制以及防控提供重要数据支撑。

关键词：鸡;金黄色葡萄球菌;大肠杆菌;奇异变形杆菌;致病性

基金资助：山西省科技创新青年人才团队(202204051001022);山西省现代农业产业技术体系建设专项资金(2021-07、2022-07、2023CYJST-09);山西省1331工程(20211331-13)