1株血清2型副猪嗜血杆菌的分离鉴定及致病性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第2期北京时间：

作者：李倩文, 华涛, 常晨, 颜星宇, 李军星, 唐波

单位：1. 江苏省农业科学院动物免疫工程研究所, 南京 210014;2. 国家兽用生物制品工程技术研究中心, 南京 210014;3. 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心, 泰州 225300;4. 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所, 杭州 310021

摘要：【目的】 明确浙江地区某猪场副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)感染情况，明确分离株的血清型、生物学特性及致病性，为临床控制副猪嗜血杆菌提供理论参考。【方法】 从发病猪的肺脏、心脏血液、关节液等病料中分离、纯化菌株，并对其进行革兰染色镜检、16S rRNA基因PCR扩增及测序，明确分离株的血清型，检测分离株携带毒力基因情况、对常见抗菌药物的敏感性及对小鼠的致病性，使用饱和硫酸铵法提取菌株分泌蛋白，并通过电泳分析蛋白主要富集区域。【结果】 分离株在TSA培养基上生长出圆形、光滑湿润、颜色灰白、边缘整齐的针尖大小的菌落；接种至TSB培养基后，1～3 h生长缓慢，3～4 h进入对数生长期，4～12 h进入生长稳定期；革兰染色镜检呈红色短杆状、长杆状，长度不等，疑似副猪嗜血杆菌。16S rRNA基因PCR扩增结果显示，出现680 bp的特异性条带，与预期相符。血清型鉴定结果显示，检测到2型血清型副猪嗜血杆菌特异性条带。BLAST比对显示该分离株为血清2型副猪嗜血杆菌。毒力基因检测结果显示，分离株携带cdtA、cdtB、cdtC、vtaA1、rfaD、rfaE、gnd、cpaD、espP2、vacJ、rfaF、vtaA2、htrA和ompP2基因。该菌株以1.0×109 CFU/mL剂量感染BALB/c小鼠，在5～10 h出现死亡，并引起小鼠肝脏细胞核浓缩、坏死,肺泡腔内有大量浆液性渗出物，混有红细胞和菌体，脾脏组织炎性细胞浸润。药敏试验结果显示，分离株对头孢哌酮、头孢呋辛钠、哌拉西林、青霉素等药物耐药，对氯霉素表现中介，对环丙沙星、左氧氟沙星、阿奇霉素等药物敏感。该菌株分泌蛋白大小主要集中在25～180 ku。【结论】 本研究分离鉴定获得1株血清2型副猪嗜血杆菌，该分离株编码多种毒力基因，具有致病性，对多种常用抗菌药物有明显的耐药性，并分泌多种蛋白。试验结果提示该猪场可使用喹诺酮类、大环内酯类及氨基糖苷类药物进行防控。

关键词：副猪嗜血杆菌;血清型;分离鉴定;致病性

基金资助：江苏现代农业产业单项技术研发(CX(23)3079)