CRISPR-Cas技术在动物病原微生物检测中的应用研究进展

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第2期北京时间：

作者：原青, 孟茹, 李国平, 张瑞

单位：1. 西南民族大学畜牧兽医学院, 成都 610041;2. 西宁市动物疫病预防控制中心, 西宁 810016;3. 大通县畜牧兽医站, 西宁 810199

摘要：动物传染病是对养殖业危害最严重的一类疾病，不仅造成动物大量死亡及其产品的损失，而且对人类健康构成重大威胁。因此，快速、准确和廉价的病原体检测方法对动物传染病防控具有重要意义。规律成簇间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)及相关蛋白(CRISPR associated protein,Cas)系统是一种灵敏、特异的生物系统，可快速识别病原体特异性核酸，在原核生物免疫系统中发挥重要作用。基于CRISPR-Cas系统的病原体检测方法具有特异性强、灵敏度高和操作便捷等优点，在动物病原微生物快速检测中具有良好的应用前景。笔者系统介绍了Ⅱ型(cas9)、Ⅴ型(cas12a、cas12b、cas14a)和Ⅵ型(cas13a)CRISPR-Cas系统，简述其工作原理和基于CRISPR-Cas系统建立的NASBA-CRISPR、CAS-EXPAR、CASLFA、DETECTR、CORDS、HOLMESv2、SHERLOCK、SHERLOCKv2、DETECTR-Cas14等快速检测方法在动物病原微生物检测中的研究及应用现状，同时对CRISPR-Cas系统在动物病原检测应用中面临的问题进行了分析，包括crRNA的特异性、与扩增技术联用、样本采集和运输方式等因素对定量检测产生的影响，并提出了一些解决方案，旨在为更深入地了解CRISPR-Cas技术在动物病原微生物检测上的应用提供参考。

关键词：病原微生物;CRISPR-Cas;病原体检测;应用

基金资助：国家自然科学基金项目(32302870)；西南民族大学引进人才科研启动金资助项目(RQD2023034)；西南民族大学中央高校基本科研业务费专项基金项目(ZYN2023048)；大通地区牦牛绿色防控技术集成与示范(2023-ZB-1)