羊呼吸道溶血性曼氏杆菌的分离鉴定及其致病性和耐药性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第5期北京时间：

作者：武佳鑫, 孙月, 毛伟, 刘淑英, 尹凯雯, 张志丹, 韩凯凡, 赵红霞

单位：1. 内蒙古农业大学兽医学院, 呼和浩特 010010;2. 兴安盟动物疫病预防控制中心, 兴安盟 137400

摘要：【目的】了解内蒙古地区养殖场引起羊呼吸道疾病的主要病原菌，并探究其致病性及耐药性，为相关疾病防治药物的选择提供参考。【方法】对采集的病死羊肺脏组织进行病原菌分离培养、生化鉴定、分子生物学鉴定，并对其进行小鼠致病性试验，采用PCR法检测分离菌株毒力基因携带情况；利用K-B法检测分离菌株的药物敏感性，通过PCR法检测分离菌株耐药基因携带情况；用牛津杯法检测中药单体小檗碱、柠檬醛和百里香酚对分离菌株的体外抑菌效果。【结果】分离菌株在血琼脂平板培养基上形成β-溶血的灰白色菌落，共分离获得2株疑似菌株，分别命名为Mh1-1和Mh1-2。生化鉴定结果显示，分离株麦芽糖、甘露糖、蔗糖、木糖、山梨醇反应均呈阳性。PCR扩增出大小为453 bp的溶血性曼氏杆菌特异性基因及306 bp的荚膜血清A1型条带。相似性比对结果显示，分离株Mh1-1与溶血性曼氏杆菌GDZJcattle2014株(登录号：KM576848.1)的相似性为98.49%，分离株Mh1-2与溶血性曼氏杆菌38599株(登录号：CP017491.1)的相似性为98.14%。经鉴定2株分离株均为血清A1型溶血性曼氏杆菌。小鼠致病性试验结果显示，分离株Mh1-1和Mh1-2对小鼠的半数致死量(LD50)分别为2.2×107和1.0×107 CFU/mL。2株分离菌株均检出毒力基因gs60、lktC、lktA、tbpB、adh和nmaA。药敏试验结果显示，分离株Mh1-1对四环素、林可霉素表现耐药，对链霉素表现中介；分离株Mh1-2对链霉素和林可霉素表现耐药，对四环素表现中介；2株分离菌株均对氧氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、复方新诺明、头孢噻肟、氟苯尼考等表现敏感。耐药基因检测结果显示，2株分离株均携带strA、strB、tetA基因。体外抑菌试验结果显示，小檗碱和柠檬醛对分离株均有较好的抑制作用。【结论】本研究从患呼吸道疾病的病死羊肺脏组织中分离获得2株荚膜血清A1型溶血性曼氏杆菌，分离株均有致病性并携带多种毒力基因，对抗菌药物林可霉素耐药并携带strA等耐药基因。试验结果为临床科学合理地选择抗菌药物提供参考依据，为后续治疗药物的开发和研究提供思路。

关键词：溶血性曼氏杆菌;分离鉴定;致病性;耐药性

基金资助：内蒙古自治区科技重大专项项目(2021ZD0013);内蒙古自治区教育厅一流学科科研专项项目(YLXKZX-NND-012)