单点氨基酸替换对杂合肽KL-21生物活性的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第5期北京时间：

作者：韩晋辉, 翟培, 吕文平

单位：1. 广东食品药品职业学院, 广州 510520;2. 江南大学, 无锡 210122

摘要：【目的】探究单点氨基酸替换对杂合肽KL-21溶血活性的影响，对比氨基酸替换前后多肽结构与活性变化，初步探讨影响KL-21生物活性的关键位点和因素。【方法】在杂合肽KL-21基础上，通过生物信息学方法筛选，将其第14位甘氨酸替换为丙氨酸获得新衍生肽KL-21a。利用多种在线工具对2种多肽进行生物信息学分析，用圆二色光谱法测定多肽的二级结构，通过检测最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)探究多肽的抗菌活性，采用分光光度法测定多肽的溶血活性。【结果】多肽KL-21a与KL-21的大多数理化特性差异较小，但与疏水性相关的理化特性差异较明显。2种多肽的二级结构均以α-螺旋为主，KL-21a的侧链更加收缩且螺旋含量低于KL-21；二者对大肠杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌和白色假丝酵母菌均有抑杀活性，对金黄色葡萄球菌抑杀效果最为相近。当多肽浓度为256 μg/mL时，KL-21溶血率＞50%，KL-21a没有溶血活性。【结论】衍生肽KL-21a具有良好抑菌活性，且溶血作用明显降低，表明第14位氨基酸是影响KL-21生物活性的关键位点，可为后续抗菌肽设计和改造提供依据和参考。

关键词：抗菌肽;杂合肽;氨基酸替换;抗菌活性;溶血作用

基金资助：广东省普通高校特色创新项目(2023KTSCX284);广东食品药品职业学院校级自然科学项目(2024ZR15)