2株鹌鹑源肺炎克雷伯菌的分离鉴定及生物学特性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第5期北京时间：

作者：龙宝琴, 王辉翔, 余林金, 哈尔勒哈·阿曼太, 陈浩然, 许梦娇, 史陇兴, 李有文

单位：1. 塔里木大学动物科学与技术学院, 阿拉尔 843300;2. 农业农村部环塔里木畜草资源利用重点实验室, 阿拉尔 843300

摘要：【目的】从腹泻鹌鹑粪便样本中分离并鉴定肺炎克雷伯菌，以期为鹌鹑肺炎克雷伯菌疾病防控提供基础。【方法】从8份腹泻鹌鹑粪便样本中筛选纯化菌落，通过平板划线法对细菌进行分离纯化培养，利用PCR扩增16S rDNA序列并测序，使用Mega 11.0软件构建系统进化树。采用K-B法检测菌株对常见抗菌药物的敏感性，并检测菌株中耐药基因和毒力基因分布情况，探究其生物学特性，通过动物试验评估菌株的致病性。【结果】本研究从腹泻鹌鹑粪便样本中分离并鉴定出2株肺炎克雷伯菌，分别命名为Ksp-A1和Ksp-A2，均属于K57血清型。系统进化树结果显示，2株分离株与其他已知肺炎克雷伯菌株相似性较高，且与肺炎克雷伯菌DB-4和WGT-31株属于同一进化分支。药敏试验结果显示，分离株对氨苄西林、苯唑西林和红霉素等表现耐药。分离株Ksp-A1和Ksp-A2均携带多种耐药基因，包括blaSHV、aacC2、oqxAB、tetA、tetM和cat1基因。2株分离株均携带毒力基因K88、hlyE、iucD、irp2、ompA和ompC。生物学特性分析显示，在pH 7.0的LB肉汤培养基中，分离株Ksp-A1和Ksp-A2均在2 h内进入对数生长期，并分别在12和9 h达到峰值。小鼠致病性试验结果显示，注射菌液后，小鼠表现被毛粗乱、精神沉郁、呼吸急促及腹泻等感染症状，且随着菌液浓度增加，小鼠死亡率逐渐上升，菌液浓度为1×109 CFU/mL时，小鼠死亡率均达100%，Ksp-A1和Ksp-A2对小鼠的半数致死剂量(LD50)分别为3.3×107和2.6×106 CFU。【结论】试验成功分离获得2株鹌鹑源K57型肺炎克雷伯菌，其对β-内酰胺类药物表现耐药，生长速度较快，对酸碱耐受能力强。研究结果为鹌鹑源肺炎克雷伯菌疾病的防治提供了基础数据。

关键词：鹌鹑;肺炎克雷伯菌;分离鉴定;耐药性;毒力基因

基金资助：新疆生产建设兵团区域创新基金项目(2021BB014);塔里木大学校长基金项目(TDZKCX202305)