1例种鹅鸭瘟病毒与多杀性巴氏杆菌混合感染的诊断及病原鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第5期北京时间：

作者：吴鹏, 袁阳, 杨芸芸, 冯轶, 王艳, 杨颖, 陈江凤, 姜海波, 文明

单位：1. 贵州大学动物科学学院, 贵阳 550025;2. 贵州大学动物疫病研究所, 贵阳 550025;3. 贵州省动物生物制品工程技术研究中心, 贵阳 550025

摘要：【目的】确定贵州某种鹅场种鹅发病死亡的病因，为种鹅多病原混合感染的防治提供参考。【方法】对发病灰鹅进行临床症状及剖检观察、组织切片观察、细菌分离培养鉴定和6种水禽常见病毒(鸭瘟病毒(DPV)、鸭圆环病毒(DuCV)、禽流感病毒(AIV)、鹅细小病毒(GPV)、鸭病毒性肝炎病毒(DHV)和禽坦布苏病毒(TMUV))PCR检测，进一步对病原菌进行相似性分析、荚膜血清型鉴定、药敏试验和致病性试验及分离病毒的致病性检测。【结果】发病灰鹅头颈肿大，肝脏表面出现灰黄色坏死灶，心脏及肺脏表面有出血点。组织切片结果显示，发病灰鹅肝脏、肺脏和肾脏均出现明显病变。分离菌株菌落呈灰白色、表面光滑的露滴状；革兰染色见红色短杆状阴性菌；瑞氏染色见两极浓染的球杆菌。生化试验结果显示，分离菌株葡萄糖、果糖、甘露醇和麦芽糖等反应为阳性。PCR检测及16S rRNA基因鉴定结果显示，分离菌株扩增出大小为460 bp的多杀性巴氏杆菌特异性基因Kmt1,且与NCBI中巴氏杆菌参考菌株16S rRNA基因序列相似性为98.6%～99.3%，鉴定其为多杀性巴氏杆菌。经血清型鉴定，分离株为A型荚膜血清型多杀性巴氏杆菌。分离菌株对诺氟沙星、庆大霉素和庆大霉素等敏感，对万古霉素中度敏感；将多杀性巴氏杆菌分离株接种小鼠，测得最小致死量(MLD)<5 CFU。病毒PCR检测及测序比对分析显示，发病灰鹅为鸭瘟病毒(DPV)感染，且DPV分离株与NCBI DPV参考株UL6基因序列相似性为98.9%～100%；经鸭胚盲传3代，尿囊液PCR检测出DPV；鸭胚成纤维细胞(DEF)接种DPV，9 h后DEF缩圆，24 h后贴壁的DEF脱落或形成合胞体；经测定，DPV分离株的半数组织培养感染剂量(TCID50)为2.88×10-9/0.1 mL。【结论】本研究最终诊断发病灰鹅为DPV与多杀性巴氏杆菌混合感染，并分离得到1株毒力较强的A型荚膜血清型多杀性巴氏杆菌与1株毒力较强的DPV，本研究结果可为多杀性巴氏杆菌与DPV感染水禽引起的疾病的防治、病原学调查和多联疫苗等提供科学依据和技术支持。

关键词：鹅;A型多杀性巴氏杆菌;鸭瘟病毒;分离鉴定;病原特性

基金资助：国家自然科学基金项目(315060703);贵州省科技平台项目(黔科合平台人才[2018]5253号);贵州省科技支撑计划项目“贵州冷水鱼健康养殖用免疫增强剂的研发与应用研究”(黔科合支撑[2017]253号)