1株耐高温热嗜淀粉芽孢杆菌的分离鉴定和产蛋白酶条件优化

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第6期北京时间：

作者：杨钦鸿, 杨佳, 段文洁, 张永仙, 朱尤帅, 杨绍红, 和塍, 尹红斌, 李素华

单位：1. 西南林业大学生物与食品工程学院, 昆明 650224;2. 云南省动物卫生监督所, 昆明 650051;3. 香格里拉市农业农村局动物卫生监督所, 香格里拉 674400;4. 怒江州动物疫病预防控制中心, 泸水 673200

摘要：【目的】从动物尸体化制副产物肉骨渣发酵反应堆中分离耐高温产蛋白酶菌株，研究其蛋白酶活性，以期为肉骨渣中蛋白降解开发利用提供理论基础和研究策略。【方法】设置高温培养条件，使用酪蛋白平板水解和蛋白酶福林酚法进行耐高温产蛋白酶菌株筛选，通过16S rRNA测序鉴定菌株；通过高温驯化、紫外诱变提升菌株的耐热性和蛋白酶活性，通过单因素试验和响应面试验探究菌株最佳产酶条件。【结果】从肉骨渣发酵反应堆中筛选出1株耐高温产蛋白酶的热嗜淀粉芽孢杆菌R4.1(Bacillus thermoamylovorans R4.1)，通过紫外诱变，蛋白酶活性提升了40.92%，高温驯化使菌株的最适生长和产酶温度由50 ℃提升至65 ℃；单因素试验结果显示，菌株蛋白酶活性受发酵时间、pH、NaCl浓度和Ca2+浓度的影响；响应面优化试验确定菌株的最适产酶条件为：65 ℃发酵96.36 h，初始pH 8.02，NaCl浓度0.59%，Ca2+浓度1.11%，接种量1%，在此条件下，蛋白酶活性为55.08 U/mL。相较于原始菌株，酶活性提升了1.96倍。此外，菌株在肉骨渣中发酵120 h后肉骨渣减重率为12.30%，粗蛋白质含量减少11.06%。【结论】热嗜淀粉芽孢杆菌R4.1具有较高的高温蛋白酶活力，能对肉骨渣中的蛋白质进行有效降解，具有良好的应用前景。

关键词：热嗜淀粉芽孢杆菌;耐高温筛选;分离鉴定;产蛋白酶条件

基金资助：大型畜禽养殖场废弃物无害化处理与高效利用研究与应用(202302AE090009)