基于体外产气法探究不同假单胞菌添加量对人工瘤胃内环境的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第6期北京时间：

作者：韩一铭, 张照杰, 高宇凤, 杨文华, 任晓丽, 宋超, 石冬梅, 章越, 马梦辉, 皇甫和平, 王金明

单位：1. 山西农业大学动物医学学院, 太谷 030801;2. 河南牧业经济学院动物医药学院, 郑州 450046;3. 河南省种业发展中心, 郑州 450045;4. 郑州市动物营养代谢病与中毒病重点实验室, 郑州 450046

摘要：【目的】探究不同假单胞菌添加量对人工瘤胃内环境的影响，筛选出适宜的假单胞菌添加量。【方法】选用4头高产奶牛作为瘤胃液的供体，以供体牛的全混合饲粮(TMR)为发酵底物。采用单因素四水平试验设计，对照组(CON)发酵底物中添加0.5 g TMR，试验组(A～D)在此基础上分别添加1×109、2×109、4×109、8×109 CFU/mL假单胞菌，每个水平设置3个重复，发酵2、4、6、8、10、12、24 h时记录pH及产气量，发酵结束后测定氨态氮(NH3-N)、微生物蛋白(microbial protein，MCP)和挥发性脂肪酸(volatile fatty acid，VFA)含量；基于16S rRNA、内转录间隔区(internal transcribed spacer，ITS)进行宏基因组测序，分析瘤胃发酵液中微生物区系的变化。【结果】①发酵10 h时，C、D组瘤胃发酵液中pH显著低于CON组(P＜0.05)；各时间点所有处理组间的产气量、NH3-N、MCP含量均无显著变化(P＞0.05)。②发酵10 h时，B组瘤胃发酵液中乙酸、丁酸、总VFA含量显著或极显著高于CON组(P＜0.05；P＜0.01)；发酵12 h时，A、B组瘤胃发酵液中异丁酸含量显著高于D组(P＜0.05)；发酵24 h时，各试验组瘤胃发酵液中丙酸、丁酸、异戊酸、乙丙比和总VFA含量显著或极显著高于CON组(P＜0.05；P＜0.01)。③C、D组瘤胃发酵液中16S rRNA和ITS的Chao1、Ace指数显著或极显著低于CON组(P＜0.05；P＜0.01)。④在16S rRNA门和属水平上，与CON组相比，D组瘤胃发酵液中变形杆菌门和克雷伯菌属相对丰度均显著升高(P＜0.05)，C和D组琥珀菌属_UCG-001、理研菌属_RC9相对丰度显著或极显著降低(P＜0.05；P＜0.01)；B组瘤胃发酵液中解琥珀酸菌属相对丰度显著高于C、D组(P＜0.05)，norank_F082菌属相对丰度显著高于D组(P＜0.05)。⑤在ITS门和属水平上，与CON组相比，B、C、D组瘤胃发酵液中柯达酵母属相对丰度显著升高(P＜0.05)；B组放线菌属相对丰度显著升高(P＜0.05)。【结论】本试验条件下，2×109 CFU/mL假单胞菌对奶牛瘤胃发酵参数无副作用，增加了VFA的产生，同时促进了纤维降解菌的增殖，因此，假单胞菌适宜添加量为2×109 CFU/mL。

关键词：体外产气法;假单胞菌;瘤胃发酵液;微生物区系

基金资助：河南省科技攻关项目(212102110377)