补骨脂乙素联合抗菌药的体外抑菌效果研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第7期北京时间：

作者：王婧, 孙志刚, 李欣洋, 吕若一, 蔡子雯, 张文静, 侯晓林, 刘晓晔

单位：1. 北京农学院动物科学技术学院, 北京 102206;2. 北京农学院, 兽医学(中医药)北京市重点实验室, 北京 102206

摘要：【目的】 探讨天然植物源黄酮化合物补骨脂乙素(isobavachalcone,IBC)及其与临床常用6种抗菌药联合应用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)的抗菌作用，观察补骨脂乙素是否对临床常用抗菌药有抗菌增效作用，为补骨脂乙素作为潜在抗菌药物或抗菌增效剂提供参考。【方法】 采用微量肉汤稀释法测定6种抗菌药(多黏菌素B、恩诺沙星、土霉素、氟苯尼考、氨苄西林、阿莫西林)对MRSA T144的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentrations，MIC)；进一步使用棋盘法联合药敏试验测定联合用药效果，利用分级抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentrations index，FICI)判定药物协同效果，筛选出具有协同增效作用的抗菌药。以金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌和沙门菌为受试菌株，探究补骨脂乙素与筛选出的抗菌药联合使用时是否对临床常见革兰阳性菌和革兰阴性菌有抗菌增效作用。利用SYTO9-PI染色法探究补骨脂乙素对受试菌株细胞膜通透性的影响，并根据PI荧光强度变化判断抗菌药在细菌内部的含量。【结果】 药敏试验结果显示，多黏菌素B、土霉素、环丙沙星、氟苯尼考、氨苄西林和阿莫西林对MRSA T144均有抑制作用，MIC为8～64 μg/mL。联合药敏试验结果显示，补骨脂乙素分别与土霉素、氟苯尼考、氨苄西林和阿莫西林联合使用时，对MRSA T144呈相加作用(FICI为0.5625～1)；补骨脂乙素与环丙沙星联合使用对MRSA T144呈无关作用(FICI＝2)；补骨脂乙素和多黏菌素B联合使用时，对MRSA T144呈协同作用(FICI＝0.5)。进一步的联合药敏试验结果显示，补骨脂乙素和多黏菌素B联合使用时，对金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌呈现协同作用(FICI为0.258～0.375)，对大肠杆菌和沙门菌呈现相加作用(FICI为0.531～0.563)。细胞膜通透性检测结果表明，与多黏菌素B和补骨脂乙素单独作用于受试菌株相比，二者联合用药时，均可显著提高膜通透性发生改变的MRSA T144、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌和沙门菌的比例(P＜0.05)。多黏菌素B在细菌中含量检测结果显示，与单独使用多黏菌素B相比，多黏菌素B和补骨脂乙素联用时大肠杆菌和MRSA T144内部的多黏菌素B浓度均显著升高(P＜0.05)。【结论】 补骨脂乙素联合多黏菌素B对MRSA、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌和沙门菌具有一定的抗菌增效作用，补骨脂乙素可改变受试菌细胞膜通透性，从而降低多黏菌素B的用药剂量。本研究可为临床治疗细菌感染提供新思路，同时也为今后拓宽多黏菌素B在畜牧业中的使用范围提供参考。

关键词：补骨脂乙素;抗菌药;抗菌增效

基金资助：国家自然科学基金(32202864)；北京市教育委员会科学研究计划(KM202310020006)；北京市科学技术协会青年人才托举工程(BYESS2023192)；北京市属高校分类发展-都市农林特色教师队伍建设(11000024T000002961733)