流产伊犁马驹主要致病菌的分离鉴定及其致病性研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第7期北京时间：

作者：卢冲, 王语嫣, 付涵, 李桐阳, 缪荣浩, 卢亚宾, 李建龙, 刘建华, 郭庆勇, 买占海, 况玲

单位：新疆农业大学动物医学学院, 乌鲁木齐 830052

摘要：【目的】 了解造成伊犁马流产的主要致病细菌，为其临床指导用药提供科学依据。【方法】 本试验采集5匹自然流产马驹的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脐带、羊膜等35份组织样品进行增菌培养、纯化、PCR鉴定及测序，并对分离菌株进行耐药性及致病性试验。【结果】 通过细菌分离培养、形态学观察从流产马驹组织中分离出6株菌，其中1株在琼脂平板上为较大的灰白色黏液菌落，挑取易拉丝，革兰阴性菌，短粗的杆状，单独或成双排列的杆菌，疑似为克雷伯菌；1株表面具有光泽，边缘不整齐半透明或不透明，革兰阴性，两端钝圆的短杆状菌，疑似为短杆菌；1株灰色或白色边缘光滑且明亮的圆形菌落，革兰阳性菌，堆聚成葡萄串状的球菌，疑似为葡萄球菌；1株表面光滑的圆形白色或乳白色菌落，革兰阴性，两端钝圆的长杆菌，疑似为大肠杆菌；1株在绵羊血琼脂平板菌落呈灰白色圆形，凸起较小、有β溶血环的菌落，革兰阳性球菌,成双或呈长链状排列的球菌，疑似为链球菌；1株在沙门菌显色培养基呈表面光滑呈紫色，边缘整齐的圆形菌落，革兰阴性，两端钝圆的短杆菌，疑似为沙门菌。6株分离菌株16S rRNA 基因PCR扩增结果显示，菌株均在1 540 bp处出现单一条带；1株分离株与GenBank上公布的克雷伯菌相似性＞95%，5株分离株分别与弗氏柠檬酸杆菌、缓慢葡萄球菌、大肠杆菌、马链球菌兽疫亚种和沙门菌的相似性＞97%，各菌株毒力基因检测结果与预期结果一致，最终确定分离的6种致病菌分别为克雷伯菌、弗氏柠檬酸杆菌、缓慢葡萄球菌、大肠杆菌、马链球菌兽疫亚种和沙门菌，分别命名为23-KLB-16S、23-NM-16S、23-HM-16S、23-DC-16S、23-ML-16S、23-SM-16S。相似性及遗传进化结果显示，分离株23-KLB-16S与克雷伯菌、23-NM-16S与弗氏柠檬酸杆菌、23-HM-16S与缓慢葡萄球菌、23-DC-16S与大肠杆菌、23-ML-16S与马链球菌兽疫亚种、23-SM-16S与沙门菌参考菌株相似性和亲缘关系较近。药敏试验结果显示，6株分离株均具有多重耐药，对四环素类及氟喹诺酮类药物较敏感，对林可酰胺类药物耐药。小鼠攻毒试验结果显示，上述6种致病菌对小鼠的半数致死量分别为1.54×102、2.59×107、3.62×107、7.02×107、6.08×106和8.15×105 CFU/只，其中克雷伯菌、马链球菌兽疫亚种及沙门菌致病性较强。小鼠剖检结果显示，肝脏、脾脏均出现不同程度的淤血与肿大，肺脏出血。【结论】 从流产马驹的组织样品中分离出克雷伯菌、弗氏柠檬酸杆菌等6种主要致病菌株，并发现存在混合感染的情况，且6株菌均具有多重耐药，对四环素类及氟喹诺酮类药物较敏感，对林可酰胺类药物耐药，其中克雷伯菌、马链球菌兽疫亚种及沙门菌具有较强的致病性。

关键词：流产;马驹;组织病理变化;分离鉴定;致病性

基金资助：国家自然科学基金青年科学基金项目(32002322)；新疆重要马病诊防关键技术的集成创新与应用(ZYYD2023C03)