《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:蒋吕鹏, 潘果, 涂会鑫, 孙思佳, 苏惠, 董文龙, 沙万里, 闫满
单位:1. 吉林农业科技学院动物科技学院, 吉林 132109;2. 吉林省预防兽医学重点实验室, 吉林 132109;3. 吉林省猪生态养殖及疫病防控科技创新中心, 吉林 132109
摘要:【目的】 筛选出一种抗多杀性巴氏杆菌的乳酸菌细菌素,完成乳酸菌全基因组测序,分析其细菌素理化特性和杀菌机制。【方法】 将健康猫粪便接种于MRS肉汤培养基,37 ℃培养12 h分离细菌。以多杀性巴氏杆菌为指示菌,通过牛津杯琼脂扩散法测定分离的乳酸菌的抑菌活性,通过16S rRNA基因扩增鉴定分离的乳酸菌,并对其进行全基因组序列测定及KEGG功能注释。采用蛋白酶敏感、热稳定性、酸碱稳定性试验测定分离菌产抑菌物质的生物学特性,运用扫描电镜技术探究抑菌物质的抗菌特性。【结果】 筛选出1株产抑菌物质的乳酸菌,其菌落表面光滑,形态较小;革兰染色后呈阳性球菌。16S rRNA测序分析显示,分离菌与融合魏斯氏菌相似性为97%,鉴定为融合魏斯氏菌,命名为JLP1。全基因组测序结果显示,融合魏斯氏菌JLP1基因组大小为2 350 892 bp,有效平均GC含量为44.94%,检测到2 020个编码基因。在KEGG数据库中共有1 051个基因得到注释,分别为环境信息处理、新陈代谢和遗传信息处理系统三大功能,共有49条代谢通路。排酸和排过氧化氢试验结果表明,融合魏斯氏菌JLP1抑菌物质并非有机酸和过氧化氢,经蛋白酶K处理后抑菌活性明显下降,推测其抑菌物质为细菌素。在40~80 ℃内融合魏斯氏菌JLP1所产细菌素抑菌活性稳定,100 ℃处理10 min不失活,具有良好的热稳定性;在pH 3.0~8.0内具有良好抑菌活性,酸碱耐受范围较大。电子显微镜扫描结果显示,融合魏斯氏菌JLP1所产细菌素攻击多杀性巴氏杆菌的细胞膜,形成孔隙,细胞表面皱缩。【结论】 融合魏斯氏菌JLP1新陈代谢和氨基酸生物合成基因较多,菌株所产细菌素理化特性稳定且抑菌效果良好,为防治多杀性巴氏杆菌感染提供有利参考。
关键词:多杀性巴氏杆菌;全基因组测序;细菌素
基金资助:吉林省自然科学基金(YDZJ202301ZYTS349)