多浪羊LIN28A基因启动子区克隆、序列分析及蛋白表达研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第7期北京时间：

作者：李伟, 黄巧艳, 王鑫昆, 谷若怀, 孙慧萍, 朱乐萧, 邢凤

单位：塔里木大学动物科学与技术学院, 农业农村部环塔里木畜草资源利用重点实验室(部省共建), 阿拉尔 843300

摘要：【目的】 探究多浪羊LIN28A基因的启动子区序列特征及蛋白表达规律，为进一步研究其在初情期的转录调控机理奠定基础。【方法】 根据NCBI中绵羊LIN28A基因序列(登录号：NC_056055.1)设计引物进行PCR扩增、克隆测序及序列比对，获取多浪羊LIN28A基因启动子区序列，并利用在线分析软件对其进行生物信息学分析。采集幼年期、初情期前、初情期及初情期后多浪羊的下丘脑、垂体和卵巢组织，利用Western blotting检测LIN28A蛋白在下丘脑-垂体-卵巢(HPO)轴中的表达情况。【结果】 多浪羊LIN28A基因启动子区序列长2 089 bp，GC含量为56.28%。LIN28A基因启动子序列包含MEIS1、STAT3、COMP1等65个转录因子结合位点，3个TATA-box，1个CpG岛，以及9个潜在转录起始位点。LIN28A蛋白在多浪羊3个组织中均有表达，以卵巢中表达水平最高，下丘脑次之，垂体中表达量最低。在初情期前多浪羊下丘脑中LIN28A蛋白表达量显著高于幼年期(P＜0.05)，在幼年期和初情期前多浪羊垂体中LIN28A蛋白表达量显著高于初情期及初情期后(P＜0.05)，卵巢中LIN28A蛋白表达量在初情期启动前后呈现稳定趋势(P＞0.05)；在同一时期，LIN28A蛋白在多浪羊下丘脑、垂体和卵巢组织中的表达量均无显著差异(P＞0.05)。【结论】 多浪羊LIN28A基因启动子区有多个与初情期相关的转录因子结合位点，为后续转录因子验证和启动子活性检测提供了试验材料。LIN28A蛋白在多浪羊HPO轴表达差异显著，为进一步研究LIN28A基因功能及调控机制提供了科学依据。

关键词：多浪羊;LIN28A基因')">LIN28A基因;启动子;初情期;下丘脑-垂体-卵巢轴

基金资助：兵团“强南”科技创新人才项目(2022CB00104)