响应面法优化副猪嗜血杆菌12型H31菌株发酵培养基组分的研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第8期北京时间：

作者：赖小婷, 吴崟沣, 任晓敏, 洪健渠, 严芬

单位：福州大学生物科学与工程学院, 福州 350108

摘要：【目的】 应用响应面法优化副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)12型H31菌株的发酵培养基组分，以提高活菌数，降低Hps 12型H31菌株发酵生产疫苗的成本，为工业化生产Hps疫苗提供参考。【方法】 通过单因素试验考察牛血清、酵母提取物、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)、硫酸镁(MgSO4)4种培养基成分对Hps 12型H31菌株活菌数的影响，确定各因素最佳水平范围后，选取合适水平进行BBD(Box-Behnken design)响应面优化设计。通过对牛血清、酵母提取物、NAD、MgSO4 4种培养基成分进行不同组合，系统优化培养基中4种组分的添加量。利用二次响应面回归方法建立活菌数与各组分之间的数学模型，并通过回归分析确定各组分对活菌数的影响程度。【结果】 单因子优化显示，活菌数较大时发酵培养基中各组分添加量区间范围分别为：牛血清8%～10%、酵母提取物0.4%～0.6%、NAD 0.05%～0.1%、MgSO4 0.3～0.5 g/L。在此基础上进一步应用响应面优化，经优化后Hps 12型H31菌株的最佳发酵培养基组分为：牛血清浓度为9.91%，MgSO4浓度为0.21 g/L，酵母提取物浓度为0.59%,NAD浓度为0.09%。与初始培养基成分相比，该菌株经优化后的活菌数从1.2×108 CFU/mL提高到3.0×109 CFU/mL，提升了24倍。【结论】 本试验通过响应面法优化Hps 12型H31菌株发酵培养基，优化后的发酵培养基能提高Hps的活菌数，为工业化生产Hps疫苗提供参考。

关键词：副猪嗜血杆菌12型H31菌株;响应面法;发酵培养基优化

基金资助：中央引导地方科技发展专项项目(2022L3033)