脂肽对蜜蜂球囊菌的抑制作用研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第9期北京时间：

作者：高杨, 常硕, 李志国

单位：1. 福建农林大学蜂学与生物医药学院, 福州 350002;2. 中国农业科学院蜜蜂研究所, 北京 100193

摘要：【目的】 探究脂肽对蜜蜂球囊菌的抑制作用和机制，以及其体外抑菌和杀菌活性。【方法】 通过形态学和分子生物学等方法鉴定蜜蜂球囊菌，采用抑菌圈试验法验证脂肽能否抑制蜜蜂球囊菌生长，采用倍比稀释法测定脂肽对蜜蜂球囊菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀真菌浓度(MFC)。采用血球计数板观察脂肽对蜜蜂球囊菌孢子萌发的影响；高效液相色谱法测定蜜蜂球囊菌细胞膜中麦角甾醇和细胞壁中几丁质含量，确定脂肽Iturin对蜜蜂球囊菌是否存在抑制作用。【结果】 显微镜观察发现，分离菌菌丝呈有隔膜的分枝状和具有球形的孢子囊、孢子等形态。18S rDNA测序结果显示,分离菌与蜜蜂球囊菌(GenBank登录号：GQ867785.1)序列相似性为100%，确定获得的菌株为蜜蜂球囊菌。脂肽伊枯草菌素(Iturin)对蜜蜂球囊菌的抑制作用最好，抑菌圈半径达8.53 mm,丰原素(Fengycin)抑菌圈半径为5.84 mm，表面活性素(Surfactin)无抑制作用。Iturin对蜜蜂球囊菌的MIC为6.25～25 μg/mL，MIC50、MIC90和MFC分别为6.25、25和50 μg/mL。与0 μg/mL Iturin处理组相比，6.25、12.5、25和50 μg/mL Iturin处理组蜜蜂球囊菌孢子萌发率均显著下降(P＜0.05)。麦角甾醇含量测定结果显示，与0 μg/mL Iturin处理组相比，12.5、25和50 μg/mL Iturin处理组蜜蜂球囊菌细胞膜麦角甾醇含量均显著下降(P＜0.05)。几丁质含量测定结果显示，与0 μg/mL Iturin处理组相比，25和50 μg/mL Iturin处理组蜜蜂球囊菌细胞壁几丁质含量显著下降(P＜0.05)。【结论】 脂肽Iturin通过减少孢子萌发，破坏细胞膜中麦角甾醇的生物合成及损害细胞壁中几丁质的合成来有效抑制蜜蜂球囊菌。

关键词：脂肽;蜜蜂球囊菌;抑制作用;麦角甾醇;几丁质

基金资助：特种动物饲料产品风险预警(农业农村部2024)