光谱法结合分子对接研究沙拉沙星与牛血清白蛋白结合作用

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第9期北京时间：

作者：马全朝, 吴海港

单位：信阳农林学院, 信阳 464000

摘要：【目的】 研究沙拉沙星(salafloxacin，SFX)与牛血清白蛋白(bovine serum albumin，BSA)的结合作用机理。【方法】 采用荧光光谱法测定SFX对BSA的荧光猝灭作用，探究SFX与BSA作用类型、结合方式、结合位点数；通过同步荧光法测定SFX对BSA内源性荧光作用，分析SFX对BSA中的酪氨酸(tyrosine，Tyr)和色氨酸(tryptophan，Trp)荧光强度的影响；通过三维荧光光谱法检测SFX和BSA的三维荧光特征，分析SFX对BSA构象的影响；采用紫外可见光谱法检测添加不同浓度SFX时BSA的紫外光谱特征，分析SFX对BSA构象的影响和猝灭类型；利用分子对接分析SFX与BSA结合位点和结合作用力；利用荧光光谱法分析金属离子对SFX和BSA结合的影响。【结果】 荧光光谱检测结果显示，SFX能猝灭BSA的内源性荧光，对BSA猝灭类型为静态猝灭；SFX与BSA结合过程是放热、自发的，结合过程发生了非辐射能量转移；SFX和BSA结合的作用力是氢键和范德华力，结合位点数约为1，分子结合距离为3.182 nm。同步荧光检测结果显示，SFX猝灭了BSA中Tyr残基和Trp残基以及肽链骨架结构的荧光。三维荧光光谱检测结果显示，SFX引起Trp和Tyr残基的荧光强度降低，导致BSA肽链结构改变。分子对接分析结果显示，SFX与BSA中的Pro498、Glu470、Lys533残基形成氢键，与Val497、Lys499残基形成疏水键，与Tyr496残基形成范德华作用力。金属离子Ca2+、Na+、K+、Al3＋对SFX与BSA结合有促进作用；Fe2＋、Mg2＋、Cu2＋表现为抑制作用。【结论】 SFX和BSA结合是自发的,形成稳定的复合物,且结合会改变BSA的构象。试验结果为揭示SFX毒性、机体内转运和代谢研究提供数据支持。

关键词：牛血清白蛋白(BSA);沙拉沙星(SFX);光谱法;分子对接;金属离子

基金资助：国家自然科学基金(32002083)；河南省自然科学基金(212300410385)