连翘酯苷A通过HIF-1α调控牦牛卵丘细胞雌激素合成与分泌

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第9期北京时间：

作者：杨娟, 潘阳阳, 王萌, 杨晓晴, 李天昊, 马鑫, 张小坤, 常剑英, 王立斌, 樊江峰

单位：1. 甘肃农业大学动物医学院, 兰州 730070;2. 甘肃省牛羊胚胎工程技术研究中心, 兰州 730070

摘要：【目的】 以健康成年(5～8岁)雌牦牛卵丘细胞为研究对象，探究连翘酯苷A(forsythiaside A，FA)对卵丘细胞雌激素合成酶的影响及作用机制，为FA应用于牦牛繁殖管理提供科学依据。【方法】 取对数生长期牦牛卵丘细胞，通过设置浓度梯度(0、5、10、20、30 和40 μmol/L)和时间梯度(12、24、36和48 h)进行细胞毒性试验，筛选FA最佳作用条件。采用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测FA对卵丘细胞低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α)、雌激素合成酶(CYP11A1、CYP17A1和CYP19A1)基因及蛋白表达的影响。通过HIF-1α特异性抑制剂LW6干扰HIF-1α的合成，将卵母细胞分为对照组、FA组及FA+LW6组，体外培养12 h后检测卵丘细胞中HIF-1α、CYP11A1、CYP17A1和CYP19A1基因及蛋白的表达量，并检测细胞上清液中雌二醇浓度。【结果】 细胞毒性试验结果显示，与0 μmol/L FA处理组相比，5 μmol/L FA孵育牦牛卵丘细胞12 h后细胞活性提升最为显著(P＜0.05)，且对HIF-1α、CYP11A1、CYP17A1和CYP19A1基因和蛋白表达量具有显著促进作用(P＜0.05)。LW6抑制试验结果显示，与对照组相比，FA组牦牛卵丘细胞中HIF-1α、CYP11A1、CYP17A1和CYP19A1基因和蛋白(除CYP19A1外)相对表达量均显著升高(P＜0.05)，HIF-1α荧光强度明显增强，雌二醇浓度显著升高(P＜0.05)；FA+LW6组牦牛卵丘细胞中HIF-1α、CYP11A1、CYP17A1和CYP19A1基因和蛋白相对表达量均显著降低(P＜0.05)，雌二醇浓度显著降低(P＜0.05)。【结论】 FA可通过HIF-1α的表达来调控雌激素合成酶的合成，从而促进牦牛卵丘细胞雌激素分泌。本研究结果为FA作为天然生殖调控剂改善牦牛繁殖性能提供了试验依据。

关键词：牦牛;卵丘细胞;连翘酯苷A(FA);低氧诱导因子-1α(HIF-1α);雌激素

基金资助：国家自然科学基金地区项目(32160859)；甘肃省重点研发计划-农业领域(24YFNA015)