牛尿液中齐帕特罗残留快速检测免疫胶体金试纸的研制

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第10期北京时间：

作者：郭东光, 齐越颖, 王兵, 蔡娟, 任雯静, 袁依佳, 陈明艳

单位：1. 新乡学院生物工程学院, 新乡 453000;2. 新乡学院化学与材料工程学院, 新乡 453000

摘要：【目的】制备快速检测齐帕特罗(zilpaterol,ZIL)残留的免疫胶体金试纸。【方法】利用过硫酸铵纯化兔源抗ZIL多抗血清，IgG梯度稀释结合NaCl稳定性测试测定胶体金标记IgG最佳浓度、制备金标复合物，并以硝酸纤维素膜为固相载体包被ZIL-BSA偶联物为检测线(T线)、羊抗兔IgG抗体为质控线(C线)，制备检测ZIL残留的免疫胶体金试纸条，并检测其灵敏度、特异性以及在牛尿液中的应用效果。【结果】抗体纯化结果显示，高免血清纯化前后多抗血清的蛋白浓度分别为5.17和2.55 mg/mL；SDS-PAGE结果显示，血清纯化后未检测到非特异性条带，且出现了明显的IgG重链(56 ku)和轻链(23 ku)条带，与预期相符。经IgG梯度稀释结合NaCl稳定性测试测定后，胶体金标记IgG的最佳浓度为1.36 μg/mL(0.17 μg/孔)；灵敏度和特异性检测结果显示，试纸条的裸眼消线值(cut-off value,COV)为1 ng/mL，检测时间为8～10 min，且与克伦特罗(CLB)、沙丁胺醇(SAL)、西马特罗(CIM)、特布他林(TBL)等8种药物均无交叉反应。牛尿液加标试验结果显示，其COV为1 ng/mL，表明试纸条对基质干扰耐受性良好。【结论】本研究成功制备了一种基于免疫胶体金技术的ZIL快速检测试纸条，其具有高灵敏度、高特异性和良好的基质耐受性，可用于畜牧产品中ZIL残留的现场筛查，为食品安全监管提供了一种快速、便捷、低成本的检测工具。

关键词：齐帕特罗;残留;免疫胶体金技术;快速检测

基金资助：河南省科技攻关项目(242102321133、192102110066)；河南省本科高校青年骨干教师培养计划项目(2024GGJS141)；国家自然科学基金项目(32102632)；2024年度新乡学院高等教育教学改革研究与实践项目(2024JGLX170)；新乡学院博士科研启动经费项目(1366020120)