氯硝柳胺及其新型口服纳米药物抗猪流行性腹泻病毒活性及作用机制

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第10期北京时间：

作者：翟崇凯, 毛福超, 田文静, 王聪慧, 王迎鲜, 张贺伟

单位：1. 洛阳职业技术学院, 洛阳 471000;2. 河南省动物疫病与公共卫生工程研究中心, 洛阳 471000;3. 河南省地标药材与生命健康工程研究中心, 洛阳 471000;4. 洛阳市动物病毒病诊断与免疫预防重点实验室, 洛阳 471000

摘要：【目的】氯硝柳胺(niclosamide,NIC)最初作为治疗肠道寄生虫的驱虫药使用，近年来研究表明其对多种病毒具有良好的抑制作用。本研究旨在评估NIC对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)的体外抗病毒效果，开发新型口服纳米化NIC制剂并评估其体内抗病毒效果，探讨其抑制PEDV感染的潜在分子机制。【方法】通过细胞毒性试验和病毒蚀斑试验评估NIC的体外抗PEDV活性；在前期胆酸盐递送系统的基础上制备增强型氯硝柳胺纳米药物(enhanced niclosamide-delivery nanoparticles，eNDN)，并对其粒径、水溶性和药代动力学特性等进行表征；在APN转基因小鼠模型中验证口服eNDN对PEDV感染的抑制作用。通过文献挖掘及生物信息学综合分析NIC抗PEDV感染的潜在靶点和信号通路，并通过分子对接初步确定NIC抑制PEDV感染的潜在核心靶点。【结果】体外抗病毒试验结果显示，NIC对PEDV具有良好的抑制作用，其半数抑制浓度(IC50)为226.4 nmol/L。与氯硝柳胺纳米药物(NDN)相比，eNDN粒径降低了约30 nm (约为140 nm)，水溶性提高了20%(达到5 mg/mL)，生物利用度提高了约10%(达到47.54%)。毒性试验结果显示，口服eNDN未引起明显临床症状或肝脏病理变化，具有良好的生物安全性。实时荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，eNDN处理组小鼠肠道内PEDV滴度极显著降低(P＜0.01)。生物信息学分析共识别出NIC的作用靶点159个，PEDV感染相关靶点1 678个，两者共有靶点22个。分子对接结果表明，MAPK14、NAIP、NLRC4、SERPINE1、ATP2A2、CLTC、MCL1、TMPRSS2、APN和STAT3为NIC抑制PEDV感染的潜在核心靶点。【结论】NIC及其新型口服纳米药物eNDN在体内外均表现出良好的抗PEDV活性，生物信息学预测NIC通过抗炎反应及抑制病毒侵入等多靶点、多通路发挥抗PEDV作用。本研究结果为探明NIC抗PEDV感染的分子机制及其纳米药物eNDN的临床转化提供了理论基础和试验依据。

关键词：氯硝柳胺;口服纳米药物;猪流行性腹泻病毒(PEDV);抗病毒感染

基金资助：河南省科技攻关项目(232102111050)；国家自然青年科学基金(32102640)；第三届河洛青年人才托举工程项目(2024HLTJ20)；2024年度河南省高层次人才国际化培养项目；2023年度中原英才计划(育才系列)中原科技创新青年拔尖人才项目