新疆驼乳源克雷伯菌分离鉴定及耐药性与耐药基因分析

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第10期北京时间：

作者：徐晓炜, 高姣姣, 马宪兰, 阿丽亚·吐尔迪, 邵伟, 郑楠, 赵艳坤

单位：1. 新疆维吾尔自治区农业科学院农业质量标准与检测技术研究所, 农业农村部农产品质量安全风险评估实验室 (乌鲁木齐), 新疆农产品质量安全实验室, 乌鲁木齐 830091;2. 新疆农业大学动物科学学院, 乌鲁木齐 830052;3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 农业农村部奶及奶制品质量安全控制重点实验室, 北京 100193;4. 伊犁职业技术学院动物科学学院, 伊犁 835000

摘要：【目的】探明新疆地区生鲜驼乳中克雷伯菌流行情况及耐药风险隐患，为该地区生鲜驼乳中克雷伯菌的监测提供理论依据。【方法】采用平板划线法对新疆地区生鲜驼乳进行细菌分离纯化，通过形态学观察、革兰染色镜检、生化鉴定及PCR技术对分离株进行鉴定，并利用微量肉汤稀释法对其耐药性进行分析，采用PCR方法对分离菌进行17种关键耐药基因检测。【结果】从新疆地区采集的95份生鲜驼乳样本中共分离出58株克雷伯菌，分离率为61.05%。所有分离株均呈隆起的粉红色圆形菌落，革兰染色镜检呈红色、短杆的革兰阴性菌。生化鉴定结果显示，分离菌尿素酶、枸橼酸盐、葡萄糖、乳糖、甘氨酸、鸟氨酸及赖氨酸检测均呈现阳性；硫化氢、甲基红试验及V-P试验结果均为阴性。PCR扩增结果显示，分离株khe特异性基因、16S rDNA PCR扩增分别获得大小为428和1 476 bp目的条带，测序结果显示分离菌16S rDNA序列与NCBI数据库中克雷伯菌的参考序列相似性均≥99.0%，综合判定分离菌均为克雷伯菌。药敏试验结果显示，分离菌对氨苄西林、磺胺异噁唑耐药率分别为27.59%和15.52%，对阿莫西林/克拉维酸、美罗培南、链霉素、庆大霉素、四环素、多四环素、氟苯尼考、环丙沙星、复方新诺明敏感率为100%，对卡那霉素敏感率为98.28%。其中有1株克雷伯菌为多重耐药菌。耐药基因检测结果显示，β-内酰胺类耐药基因中，blaCTX-M-14、blaSHV、blaCTX-M-123、blaCTX-M阳性率分别为28.0%、24.0%、24.0%和4.0%。未检出多肽类耐药基因mcr-1、mcr-2、mcr-3和磺胺类耐药基因sul1、sul2、sul3。【结论】新疆地区生鲜驼乳中克雷伯菌流行情况较严重，且存在部分耐药现象，因此，对生鲜驼乳中克雷伯菌耐药性的监测具有重要意义。

关键词：驼乳;克雷伯菌;药敏试验;耐药基因

基金资助：国家自然科学基金(32460881)；自治区杰出青年基金(2024D01E12)；自治区天山英才项目(2023TSYCCX0034)；新疆农业科学院农业科技创新稳定支撑项目(xjnkywdzc-2024003-51)