二甲双胍对种鸽卵巢衰老的缓解作用研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第11期北京时间：

作者：赵星晨, 高求炜, 梁雅妍, 高铭, 王玮, 周烁

单位：1. 仲恺农业工程学院动物科技学院, 广州 510225;2. 阳江市公安局刑警支队, 阳江 529500

摘要：【目的】本研究旨在探讨二甲双胍对种鸽卵巢衰老的缓解作用。【方法】①选用40对6年龄种鸽，随机分为2组，分别饲喂含0(对照组)和62.5 mg/kg二甲双胍的饮用水，试验期为40 d。试验结束后采集各组种鸽血液进行血清抗氧化能力指标测定，采集卵巢组织检测糖酵解相关基因表达水平，同时通过 Western blotting检测葡萄糖转运蛋白 1(glucose transporter 1，GLUT1)、己糖激酶2(hexokinase 2，HK2)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)表达量及AMPK和AKT磷酸化水平。②选用3年龄种鸽，屠宰后采集小白卵泡并洗净。试验分为4组：对照组、H2O2组、二甲双胍+H2O2组和二甲双胍组，培养72 h后收集小白卵泡免疫荧光染色检测LDHA、HK2和GLUT1蛋白定位；Western blotting试验，检测磷酸化AMPK、磷酸化AKT、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2，Bcl2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein，BAX)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)蛋白含量；实时荧光定量PCR检测PFKP、ENO1、LDH、ALDOB和GLUT1等基因表达量。③建立卵泡颗粒细胞培养模型，试验共分为4组：对照组、H2O2组、二甲双胍+H2O2组和二甲双胍组，培养72 h后收集颗粒细胞进行EdU染色。【结果】①体内试验结果显示，与对照组相比，饲喂二甲双胍种鸽产蛋量和卵巢重显著提高(P＜0.05)。实时荧光定量PCR结果显示，饲喂二甲双胍显著提高了种鸽卵巢糖酵解相关基因PFKP、PFKL、ENO1、LDHA、LDHC、LDHB、ALDOB和GLUT1 mRNA表达量和抗氧化能力(P＜0.05)。②H2O2诱导体外卵泡衰老模型免疫荧光染色结果显示，LDHA、HK2和GLUT1蛋白主要定位于卵泡颗粒层。Western blotting结果显示，与对照组相比，H2O2组颗粒层中LDHA、HK2、GLUT1、p-AKT/AKT和PCNA表达量显著下调(P＜0.05)，Bax∶Bcl2值显著上调(P＜0.05)。与H2O2组相比，二甲双胍+H2O2组颗粒层中LDHA、HK2、GLUT1、p-AKT/AKT和PCNA的表达量显著上调(P＜0.05)，Bax∶Bcl2值显著下调(P＜0.05)。实时荧光定量PCR结果显示，与对照组相比，H2O2组PFKP、ENO1、LDH、ALDOB和GLUT1等基因mRNA表达量显著下调(P＜0.05)；与H2O2组相比，二甲双胍+H2O2组PFKP、ENO1、LDH、ALDOB和GLUT1等基因mRNA表达量显著上调(P＜0.05)。③在卵泡颗粒细胞培养模型中，EdU结果显示，与对照组相比，H2O2组颗粒细胞增殖减少。与H2O2组相比，二甲双胍+H2O2组颗粒细胞增殖增加。【结论】二甲双胍能通过激活AMPK/Akt信号通路，提高卵泡颗粒细胞糖酵解水平，缓解种鸽卵巢衰老，提高产蛋性能，进而提高种鸽的经济效益。

关键词：二甲双胍;种鸽;糖酵解;AMPK/Akt信号通路;卵巢

基金资助：国家自然科学基金面上项目(32402850、32172815)；广东省基础与应用基础研究基金(2023A1515111106)