细粒棘球绦虫胰岛素样生长因子1受体蛋白的生物信息学分析及多克隆抗体制备

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第11期北京时间：

作者：夏衣旦木·吐尼牙孜, 廖霞, 李婧, 贾雨桐, 赵金龙, 杜韫, 方梓屹, 林仁勇, 吕国栋

单位：1. 新疆医科大学药学院, 乌鲁木齐 830054;2. 新疆医科大学第一附属医院, 乌鲁木齐 830054;3. 新疆大学生命科学与技术学院, 乌鲁木齐 830054

摘要：【目的】对细粒棘球绦虫的胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor of Echinococcus granulosus sensu stricto，EgIGF-1R)蛋白进行生物信息学分析，制备EgIGF-1R的多克隆抗体并定位其在幼虫阶段的表达。【方法】使用Mega 11.0软件对EgIGF-1R(GenBank登录号:XP_024354248.1)及其同源基因的氨基酸序列进行ClustalW多重比对，并构建系统进化树。通过生物信息学方法分析EgIGF-1R蛋白的理化特征、跨膜区域、蛋白结构等生物学信息。选择EgIGF-1R的优势肽段免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体，并利用ELISA方法检测抗体效价。通过免疫组织化学、免疫荧光试验定位检测EgIGF-1R在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡阶段的表达情况。【结果】氨基酸序列比对结果显示，EgIGF-1R与日本血吸虫、智人IGF-1R同源基因氨基酸序列相似性分别为32.02%和31.57%。进化树分析结果显示，EgIGF-1R与多房棘球绦虫、布氏姜片虫及日本血吸虫的亲缘关系较近；与智人、小鼠等物种的亲缘关系较远。生物信息学分析结果显示，EgIGF-1R蛋白含有1 680个氨基酸；EgIGF-1R蛋白分子质量为1.839×105 u，等电点为8.59；具有2个跨膜区域，分别位于第1 034－1 056和1 164－1 186位氨基酸，是一种跨膜蛋白；其含有18个酪氨酸磷酸化位点、123个丝氨酸磷酸化位点和60个苏氨酸磷酸化位点。EgIGF-1R蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲占比分别为21.19%、16.61%和62.20%；3D结构中N-端和C-端相距较远。EgIGF-1R与人源胰岛素样生长因子1及人源胰岛素的对接分数分别为－1 739.46和－1 099.10 kJ/mol。ELISA结果显示，EgIGF-1R多克隆抗体效价为1∶64 000。免疫组织化学和免疫荧光试验结果显示，EgIGF-1R在原头蚴的顶突、吸盘和被膜表达，在囊泡的生发层表达。【结论】EgIGF-1R蛋白具有结合人源胰岛素生长因子1等细胞因子的结构域，表达于细粒棘球绦虫的原头蚴和囊泡等幼虫阶段，本研究制备的EgIGF-1R多克隆抗体为研究EgIGF-1R在细粒棘球绦虫致病机制中的作用奠定了基础。

关键词：细粒棘球绦虫;胰岛素样生长因子1受体;生物信息学分析;多克隆抗体

基金资助：新疆维吾尔自治区自然科学基金(2022D01E66)；新疆维吾尔自治区天山英才——青年拔尖人才计划(2022TSYCCX0111)