布鲁氏菌ABC转运蛋白相关基因cydDC缺失株的构建及生物学特性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第11期北京时间：

作者：姜治强, 张皓博, 刘蒙达, 孙翔翔, 邵卫星, 常璐, 亓菲, 孙世雄, 焉鑫, 南文龙, 孙淑芳, 樊晓旭, 黄保续

单位：1. 东北农业大学动物医学学院, 哈尔滨 150000;2. 中国动物卫生与流行病学中心, 青岛 266032;3. 农业农村部反刍动物重大疫病防控重点实验室(东部), 青岛 266032;4. 山东农业大学动物科技学院, 泰安 271000

摘要：【目的】探究ABC转运蛋白相关基因cydDC在布鲁氏菌中的生物学功能，揭示其在应激和细胞内存活方面的作用。【方法】以羊种布鲁氏菌16M为研究对象，利用同源重组技术构建基因缺失株16MΔcydDC，并通过回补质粒转化的方法构建其回补株16M CΔcydDC，通过比较3种菌株的生长特性、应激敏感性、胞内存活能力及炎症因子诱导水平，系统评估cydDC基因的功能。【结果】PCR鉴定结果显示，16M野生株可获得大小为4 504 bp的特异性条带，而缺失株16MΔcydDC和回补株16M CΔcydDC特异性条带大小为1 088 bp，互补株还扩增出大小为3 819 bp的条带，证实菌株构建成功；3种菌株在相同体外培养条件下的生长趋势相似；但体外应激试验结果显示，16MΔcydDC缺失株对酸性(pH 4.0～4.5)和氧化(1 mmol/L H2O2)应激的敏感性显著高于野生株和互补株(P＜0.05)。胞内增殖试验和促炎因子mRNA水平表达结果显示，与野生株和互补株相比，在感染24 h时，缺失株16MΔcydDC在RAW264.7细胞内的存活能力显著降低(P＜0.05)，炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达显著上调(P＜0.05)。【结论】ABC转运蛋白系统相关基因cydDC有利于布鲁氏菌在酸性应激、氧化应激和细胞内环境下存活，通过调控细胞炎症反应，减少此类刺激对细菌的损伤。

关键词：布鲁氏菌;cydDC基因')">cydDC基因;基因缺失;生物学特性

基金资助：国家重点研发计划项目(2021YFD1800402)；国家现代农业产业技术体系建设项目(CARS-36)；青岛市科技惠民示范专项(24-1-8-xdny-4-nsh)