广西黄牛FGF2基因克隆、生物信息学分析及其在卵泡中的表达研究

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第11期北京时间：

作者：王云, 郑彦梓, 唐振华, 王燕新, 贾茹茹, 韦春烨, 周东平, 卢瑛, 黄荣春, 石德顺, 陆凤花

单位：1. 广西大学动物科学技术学院, 广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室, 南宁 530000;2. 钦州市动物疫病预防控制中心, 钦州 535000;3. 广西壮族自治区水牛研究所, 南宁 530000

摘要：【目的】克隆广西黄牛成纤维生长因子2(fibroblast growth factor 2，FGF2)基因CDS区序列并进行生物信息学分析，探究FGF2基因在广西黄牛不同组织及卵泡中的表达规律，为进一步探讨FGF2基因在卵泡发育过程中的功能奠定基础。【方法】以广西黄牛卵巢组织cDNA为模板，克隆FGF2基因片段，与其他物种进行相似性比对及系统进化树构建，并通过在线软件对FGF2蛋白进行生物信息学分析。利用实时荧光定量PCR检测FGF2基因在广西黄牛不同组织中的表达水平，采用ELISA方法检测小(卵泡直径3～4 mm)、中(5～8 mm)、大(＞8 mm)卵泡卵泡液中的FGF2浓度，并结合免疫荧光技术及实时荧光定量PCR探究FGF2基因在广西黄牛卵泡中的定位及表达规律。【结果】广西黄牛FGF2基因CDS区全长468 bp，共编码155个氨基酸。广西黄牛FGF2蛋白氨基酸序列与猪、山羊、绵羊、兔的相似性超过98%，在哺乳动物中表现出高度保守性。生物信息学分析发现，广西黄牛FGF2蛋白为含14个磷酸化位点的碱性亲水蛋白，二级结构以无规则卷曲(61.94%)和延伸链(29.03%)为主，主要互作蛋白包括FGFR、PDGFRA、GPC1、EGFR等。组织表达分析发现，FGF2基因在广西黄牛各组织中均有表达，其中在卵巢和肺脏组织中的表达量显著高于其他组织(P＜0.05)。检测不同直径卵泡卵泡液中的FGF2浓度发现，直径＞8 mm卵泡卵泡液中的FGF2浓度显著高于3～4 mm卵泡(P＜0.05)。FGF2基因在卵母细胞中表达量显著高于颗粒细胞和卵泡膜细胞(P＜0.05)，其受体FGFR1基因在卵母细胞中表达量显著低于颗粒细胞和卵泡膜细胞(P＜0.05)。【结论】广西黄牛FGF2基因CDS区序列长468 bp，编码155个氨基酸，为稳定的碱性亲水蛋白，二级结构以无规则卷曲为主。FGF2基因在卵巢和肺脏组织中的表达量较高，在卵泡中主要来自卵母细胞，通过卵泡直径依赖性浓度变化调控卵泡发育。以上结果可为阐明FGF2基因在广西黄牛卵巢中的功能网络提供理论依据。

关键词：广西黄牛;FGF2基因')">FGF2基因;克隆;生物信息学;表达模式;卵泡发育

基金资助：广西农业科技自筹经费项目(Z2024128)；国家自然科学基金(32160788)