朱鹮源弗氏柠檬酸杆菌分离鉴定及基因组特征分析

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第12期北京时间：

作者：黄培宏, 王可, 刘建勤, 杨嘉豪, 魏佳欣, 李本睿, 何瑜, 陈小军

单位：1. 湖南农业大学动物医学院, 长沙 410128;2. 长沙市动物疫病预防控制中心, 长沙 410013

摘要：【目的】明确1例野生死亡朱鹮的主要病原菌,并对其进行耐药性、致病性及生物学特性分析，为相关疾病的防治提供参考。【方法】无菌采集湖南崀山自然保护区内死亡朱鹮的肝脏、小肠及胸腔积液样本进行细菌分离培养。通过菌落形态观察、革兰染色及全自动微生物质谱系统进行菌株鉴定；利用定量悬浮法评估不同消毒剂对分离菌的消杀效果；采用微量肉汤稀释法检测分离菌的药物敏感性；通过全基因组测序分析分离菌耐药基因、毒力因子及多位点序列分型(MLST)情况；利用Parsnp软件构建系统发育树，并通过动物试验检测菌株致病力。【结果】试验从死亡朱鹮小肠中分离得到4株细菌。分离菌在血平板上呈乳白色菌落，在LB固体培养基上为半透明、表面有光泽的菌落,革兰染色镜检结果为革兰阴性短杆菌。全自动微生物质谱检测系统鉴定显示，4株菌均为弗氏柠檬酸杆菌，分别命名为ZhLB2、ZhX1、ZhX4和ZhX5。消毒剂消杀试验结果显示，10种受试消毒剂在推荐浓度下对分离菌均具有良好杀菌效果，其中月苄三甲氯铵和浓戊二醛溶液效果最佳。药敏试验结果显示，4株分离菌对复方新诺明、多黏菌素B、头孢西丁及美罗培南均完全耐药(4/4)，对氨苄西林、恩诺沙星和氟苯尼考高度耐药(3/4)；4株分离菌对头孢噻呋和庆大霉素均表现敏感，但仅分离株ZhLB2对四环素表现敏感。全基因组测序分析结果显示，4株分离株共携带blaCMY、qnrB等16种耐药基因及44种毒力因子；MLST分型显示，分离株ZhX1、ZhX4属于ST580型，ZhLB2、ZhX5为未知分型。系统发育树结果显示，分离株ZhLB2和ZhX5分别与孟加拉国鸡源和斯里兰卡水源弗氏柠檬酸杆菌处于同一分支，ZhX1、ZhX4均与中国水源弗氏柠檬酸杆菌处于同一分支。1×109 CFU/mL菌液感染小鼠，分离株ZhX1、ZhLB2、ZhX4、ZhX5的致死率分别为70%、40%、20%和10%，病理学检查可见特征性肺部出血和小肠炎症。【结论】本研究从朱鹮小肠中分离获得4株弗氏柠檬酸杆菌，其具有多重耐药性，对小鼠具有致病性。本研究结果为珍稀鸟类疾病防控体系的完善提供了重要理论基础，同时为指导临床合理用药提供了参考。

关键词：朱鹮;弗氏柠檬酸杆菌;分离鉴定;全基因组测序;致病性

基金资助：湖南省教育厅资助科研项目(22B0189)；长沙市动植物疫病预防控制中心资助项目(0123017)