鸡源鸭疫里默氏杆菌与禽呼肠孤病毒混合感染的诊断与病原分析

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第12期北京时间：

作者：张倩, 刘爱晶, 白光烨, 杨景晁, 衣服德, 陈嘉宁, 赵心茹, 郝小静, 潘青

单位：1. 青岛市畜牧工作站(青岛市畜牧兽医研究所), 青岛 266100;2. 青岛农业大学动物医学院, 青岛 266109;3. 山东省畜牧总站, 济南 250010

摘要：【目的】2024年12月,山东省平度市某商品代白羽肉鸡养殖场28日龄肉鸡群出现跗关节肿大、瘫痪症状，陆续出现死亡，为确定引起该场鸡群发病的病因,本研究对送检的病死鸡进行剖检和实验室诊断。【方法】采集病鸡肝脏、脾脏组织、脏器外层纤维素性渗出物、关节腔分泌物、咽喉拭子,通过实时荧光定量PCR/RT-PCR方法对引发类似临床症状的传染病病原鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)、禽呼肠孤病毒(Avian reovirus,ARV)、鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae，MS)核酸进行检测，确定发病原因。通过对关节腔分泌物进行细菌分离培养、革兰染色镜检观察、血清型鉴定、16S rRNA基因序列分析及药物敏感性试验确定病鸡感染细菌特性及药物敏感性情况；将组织样品接种LMH细胞扩繁，用PCR方法检测病毒性病原的主要结构蛋白基因并进行测序分析,确定病鸡感染病毒的分子流行病学情况。【结果】实时荧光定量PCR/RT-PCR检测显示，RA、ARV Ct值＜35，判定为阳性；MS无Ct值，判定为阴性。细菌学试验结果显示,分离菌株在血平板、TSA平板上呈半透明圆形突起、边缘整齐、表面光滑小菌落,该菌为单个和成对的革兰阴性短杆菌，疑似为RA。血清型鉴定结果显示，该分离菌株为RA血清10型。分离菌16S rRNA基因扩增测序结果经BLAST分析与鸭源RA参考菌株位于同一分支，相似性＞99%，鉴定分离菌为RA。药敏试验结果显示,该分离菌株对头孢曲松、头孢噻肟、多黏菌素B敏感,对新霉素、庆大霉素、卡那霉素、氨苄西林、阿莫西林、环丙沙星耐药。PCR检测细胞培养物显示，ARV σC基因核酸阳性,进一步对该基因片段分析发现，该毒株属于基因GC1-sub型，与经典疫苗株S1133、1733株不在同一分支。【结论】本研究通过综合诊断方法明确了该鸡场发病的病因为RA与ARV混合感染,RA分离株具有一定的耐药性，ARV分离株属于GC1-sub分支,本研究结果可为青岛地区商品肉鸡疫病科学防控提供参考。

关键词：鸭疫里默氏杆菌;禽呼肠孤病毒(ARV);混合感染;诊断;病原分析

基金资助：现代农业产业技术体系(CARS-40)；青岛市科技惠民示范专项(24-1-8-xdny-21-nsh)；地方特色优质蛋鸡新品种培育及推广(2022LZGCQY016)