体细胞核移植克隆西藏濒危樟木牛

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第12期北京时间：

作者：齐浩南, 霍浩楠, 曹磊, 张元庆, 黄永业, 余大为

单位：1. 山西农业大学动物科学学院, 太谷 030801;2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193;3. 东北大学生命科学与健康学院, 沈阳 110169

摘要：【目的】西藏特有牛种樟木牛濒临灭绝，本研究旨在采用体细胞核移植技术开展抢救性保护，为高海拔地区濒危物种保护提供新的途径。【方法】采用酶消化法建立樟木牛耳缘成纤维细胞，通过体细胞核移植技术制备重构胚胎，并移植至代孕母牛进行体内发育。采集流产个体组织进行亚硫酸氢盐测序，对父系表达基因10-ε肌聚糖(paternally expressed gene 10-sarcoglycan epsilon，PEG10-SGCE)、胰岛素样生长因子2-H19印迹母源表达转录本(insulin-like growth factor 2-H19 imprinted maternally expressed transcript，IGF2-H19)和鸟苷酸结合蛋白α亚基(guanine nucleotide-binding protein alpha subunit，GNAS)印迹域开展甲基化分析。【结果】本研究成功制备核型正常的樟木牛耳缘成纤维细胞，作为体细胞核移植供体细胞。移植32枚体细胞核移植囊胚至21头代孕母牛子宫，其中12头受孕成功，5头发育到期并成功诞下克隆牛。短串联重复序列分析发现，克隆牛的核DNA与供体牛成纤维细胞的核DNA完全匹配。对妊娠270 d发生流产的2头胎儿进行分析发现，PEG10-SGCE、IGF2-H19和GNAS印迹域在流产胎儿胎盘中呈现高甲基化，且GNAS印迹域在流产胎儿不同的组织中则呈现或低或高甲基化的异常状况。【结论】体细胞核移植技术能够应用于濒危樟木牛的抢救性保护。

关键词：樟木牛;濒危;物种保护;体细胞核移植;甲基化

基金资助：西藏自治区重点研发计划(CGZH2023000257)；国家重点研发计划(2024YFD12007000)