马乳清蛋白ACE、DPP-Ⅳ、AG抑制肽的分离及鉴定

来源：中国畜牧兽医杂志2025年第12期北京时间：

作者：娄肖肖, 赵艳坤, 郑楠, 陈贺, 马梅, 邵伟

单位：1. 新疆农业大学动物科学学院, 新疆奶业工程技术研究中心, 乌鲁木齐 830063;2. 新疆维吾尔自治区农业科学院 农业质量标准与检测技术研究所, 农业农村部农产品质量安全风险评估实验室, 新疆农产品质量安全实验室, 乌鲁木齐 830091;3. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 农业农村部奶及奶制品质量安全 控制重点实验室, 北京 100193

摘要：【目的】从马乳清蛋白水解产物中分离鉴定对血管紧张素转换酶(ACE)、二肽基肽酶-Ⅳ(DPP-Ⅳ)和α-葡萄糖苷酶(AG)具有多重抑制活性的多肽。【方法】自新疆乌鲁木齐南山牧场采集15份生马乳样品，以马乳清蛋白为底物，分别用单酶(胰蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶)、双酶(胰蛋白酶＋中性蛋白酶)和三酶(胰蛋白酶＋中性蛋白酶＋碱性蛋白酶)进行水解，通过超滤法对水解产物进行分离；通过测定ACE抑制活性评价各级分离产物的降血压活性，通过测定AG抑制活性和DPP-Ⅳ抑制活性评价各级分离产物的降血糖活性；通过液质联用(LC-MS/MS)的方法鉴定多肽的氨基酸组成，根据鉴定结果化学合成活性较好的多肽，并体外测定其抑制活性。【结果】与单酶、双酶水解产物相比，三酶水解产物的水解度(74.33%)、ACE抑制活性(22.81%)、DPP-Ⅳ抑制活性(23.46%)及AG抑制活性(20.77%)均显著提高(P＜0.05)。从活性最优的三酶水解产物中分离鉴定出具有多重抑制活性的新型多肽系列(HSVAMAASDISLLDSESAPLR、TQMVDEEIMEK、VQIVPDLTR、RALQPLPGRVQIVPDLTR、TELTEEEKNYLK、LRPTPEDNLEIILR)；体外化学合成这几种多肽，并测定其活性，结果显示，TQMVDEEIMEK对ACE抑制率达99.89%，VQIVPDLTR对DPP-Ⅳ抑制率达90.85%，TELTEEEKNYLK对AG抑制率达97.87%。【结论】本研究从马乳清蛋白水解产物中成功分离鉴定出6种具有ACE、DPP-Ⅳ、AG多重抑制活性的新型多肽，为马乳功能性产品的开发提供了理论依据。

关键词：马乳清蛋白;生物活性肽;抑制活性

基金资助：新疆维吾尔自治区重点研发项目(2023B02034-1)；国家重点研发计划(2022YFD1600103)；新疆维吾尔自治区重大科技专项(2022A02006-3-2)；新疆维吾尔自治区现代农业产业技术体系(XJARS-11-09)