《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:宋鹏琰, 锡建中, 陈晓勇, 方翟, 邢凤, 周荣艳
单位:1. 塔里木大学动物科学与技术学院, 阿拉尔 843300;2. 农业农村部环塔里木畜草资源利用重点实验室, 阿拉尔 843300;3. 河北农业大学动物科技学院, 保定 071001
摘要:【目的】挖掘miR-200b生物学功能并探究其对小鼠卵泡发育的影响。【方法】利用NCBI数据库获取人、小鼠、大鼠、斑马鱼、猪和绵羊miR-200b成熟序列,通过在线软件WebLogo进行序列分析,利用TargetScan和miRDB软件预测小鼠miR-200b靶基因,并进一步对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析;通过腹腔注射miRNA antagomir构建小鼠miR-200b颉颃模型,采集小鼠血液及组织器官样本,利用实时荧光定量PCR检测卵巢中miR-200b表达水平;计算脏器系数,通过HE染色观察卵巢组织形态变化,并对卵泡进行计数;利用ELISA检测血清雌二醇(E2)水平。【结果】不同物种miR-200b种子序列完全相同、成熟序列末端1~2个碱基存在差异;TargetScan和miRDB软件预测的共有靶基因共607个,其主要显著富集在转录调控、DNA和蛋白结合等GO条目,以及PI3K-Akt、MAPK、长寿调节、雌激素等KEGG信号通路。与Control和antagomir NC组相比,miR-200b颉颃组小鼠卵巢中miR-200b表达水平极显著下调(P<0.01),卵巢指数和腔前卵泡数极显著降低(P<0.01),有腔卵泡数极显著增多(P<0.01),同时伴随卵泡体积增大、颗粒细胞增多;血清雌二醇水平极显著升高(P<0.01)。【结论】miR-200b对小鼠卵泡颗粒细胞生长及卵泡发育起负向调控作用,研究结果为深入剖析miR-200b对卵泡发育的调控功能提供了依据。
关键词:小鼠;miR-200b;生物学功能;卵泡发育
基金资助:国家自然科学基金青年基金(32402760);塔里木大学校长基金(TDZKBS202410)