《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:连凯琪, 王宇航, 孟祥凤, 张明亮, 周玲玲
单位:1.安阳工学院生物与食品工程学院,安阳 4550002.河南省兽用生物制品研发与 应用国际联合实验室,安阳 455000
摘要:目的 为确诊安阳动物园一起蓝孔雀急性死亡病例,本研究开展了临床诊断与实验室检测。 方法 观察病死孔雀临床症状和病理变化,通过鉴别培养基、革兰染色、生化鉴定、16S rRNA基因PCR扩增及构建系统发育树、动物试验等方法分离鉴定病原菌,利用结晶紫染色法对分离菌进行生物被膜形成能力检测,采用K-B纸片法进行药敏试验,通过PCR检测耐药基因。 结果 死亡孔雀体表无明显症状,对孔雀进行剖检观察发现,其心包积液增多、浑浊,肝脏肿大,肾脏有尿酸盐沉积,肠道出血。无菌采集死亡孔雀肝脏组织,划线接种于麦康凯培养基,分离出粉红色菌落,镜检观察到病原菌呈红色短杆状,单个或成对散在分布,疑似肠杆菌科细菌。生化鉴定结果显示,分离菌吲哚、MR、戊糖、山梨醇等为阳性,西蒙氏枸橼酸盐、V-P、尿素、硫化氢等为阴性;16S rRNA基因PCR扩增片段经测序得到大小约为1 500 bp的序列(GenBase登录号:C_AA110994.1)。系统发育树显示,分离菌株与大肠杆菌相似性最高,为100%,确定该分离菌为大肠杆菌;分离菌比标准菌株被膜形成能力强,且能导致BALB/c小鼠肝脏和脾脏肿大、肺脏淤血、肠壁变薄、肠道出血、肠绒毛脱落等。分离菌对左氧氟沙星、诺氟沙星等药物敏感,对四环素、链霉素等耐药。耐药基因PCR扩增结果显示,分离菌检测到tetA、ampC、blaTEM、Sul1、Sul2和strA-strB 6个耐药基因。 结论 本研究分离到1株蓝孔雀源致病性大肠杆菌。药敏试验结果显示,该大肠杆菌菌株对左氧氟沙星、诺氟沙星等药物敏感,对四环素、链霉素等耐药,并携带6种耐药基因。本研究结果可为蓝孔雀大肠杆菌病的诊断和临床用药提供借鉴。
关键词:蓝孔雀;大肠杆菌;分离鉴定;耐药性
基金资助:国家自然科学基金青年项目(31802170);河南省科技攻关计划项目(242102110073);安阳市重点研发与推广专项(2023C01NY013);安阳工学院博士启动基金项目(BSJ2024005)