基于化学衍生和质谱技术的苹婆酸定量方法研究

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第1期北京时间：

作者：王芙蓉, 冯潇慧, 冯胜楠, 张正杰, 王玉娇, 孟庆石, 张春香

单位：1.山西农业大学动物科学学院，太谷 0308012.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，畜禽营养与饲养全国重点实验室，北京 100193

摘要：目的 试验旨在建立准确测定棉粕和饲料中苹婆酸含量的检测方法，以合理利用棉粕蛋白资源。 方法 通过优化2-吡啶甲酰肼与苹婆酸的反应条件、苹婆酸提取流程和质谱检测参数，建立采用外标法的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）定量苹婆酸的方法，并考察该检测方法的线性范围、检测限、定量限、回收率、批内与批间精密度和准确度，使用该方法进行实际样品检测。 结果 优化后2-吡啶甲酰肼与苹婆酸的最佳反应溶液组成为500 mmol/L EDC、15 mmol/L HOAt和40 mmol/L 2-吡啶甲酰肼，最佳反应温度为20 ℃，最佳反应时间为60 min。游离态苹婆酸的最佳提取液为甲醇，结合态苹婆酸最佳水解条件为50 ℃水解12 h。苹婆酸在1~1 000 ng/mL范围内线性关系良好，相关系数（r）均>0.99，检测限为5 μg/kg，定量限为12.5 μg/kg。游离态苹婆酸的回收率为80.13%~95.30%，批内变异系数为1.01%~2.21%，批间变异系数为1.61%~2.38%；结合态苹婆酸的回收率为85.46%~105.20%，批内变异系数为0.79%~2.01%，批间变异系数为3.40%~6.22%。经实际样品验证，建立方法可以精确测定棉油、棉粕、脱酚棉粕和棉籽蛋白原料中的苹婆酸，检测范围在0.09~1 812.76 mg/kg之间。 结论 本研究建立的LC-MS/MS检测方法具有高灵敏度、高准确度和高精密度等优点，适用于饲料中游离态和结合态苹婆酸的检测，可为合理利用棉粕提供技术支撑。

关键词：苹婆酸;棉粕;衍生化;定量

基金资助：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(Y2024PT01);现代农业产业技术体系(2024-14)