鸡传染性法氏囊病病毒BJQ902株感染性克隆的构建

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第2期北京时间：

作者：吕然, 杨鸿玮, 涂敏, 孟昭英, 靳换, 章振华

单位：1.北京农学院动物科学技术学院，北京 1022062.北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京 100097

摘要：目的 利用反向遗传操作技术构建鸡传染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）BJQ902株感染性克隆，为疫苗的开发及病毒复制和致病机制研究提供重要工具。 方法 以BJQ902株全基因组序列为基础，利用PCR技术扩增IBDV BJQ902株基因组A、B片段，并在A、B片段两端分别引入自裂解核酶RiboJ和HDVrz序列，利用同源重组技术将带有核酶结构的A、B片段插入到载体pCAGGS上，构建重组质粒pCAGGS-BJQ-RAH和pCAGGS-BJQ-RBH，将重组质粒pCAGGS-BJQ-RAH和pCAGGS-BJQ-RBH共转染DF-1细胞，连续盲传3代拯救重组BJQ902株（rBJQ902）。将BJQ902株及rBJQ902株感染DF-1细胞，利用PCR、Western blotting和间接免疫荧光试验（IFA）鉴定rBJQ902株。 结果 成功获得了BJQ902株基因组A、B片段，大小分别为3 260和2 827 bp；将自裂解核酶RiboJ和HDVrz序列分别连在A、B片段两端，大小分别为3 436和3 033 bp；将带有核酶序列的A、B片段分别连接到pCAGGS载体上，成功获得了重组质粒pCAGGS-BJQ-RAH和pCAGGS-BJQ-RBH；在DF-1细胞中连续盲传3代获得rBJQ902株；与亲本毒株BJQ902相比，感染DF-1细胞48 h后，rBJQ902株也可扩增得到VP2片段；rBJQ902株的病变与亲本株一致；Western blotting和IFA都可检测到rBJQ902株VP2蛋白的表达，该毒株在细胞培养中展现出与亲本病毒相似的生物学特性。 结论 本研究成功获得了BJQ902株的感染性克隆毒株rBJQ902，为深入研究 IBDV 的生物学特性及致病机制提供了技术支持，为后续病毒学研究奠定基础。

关键词：传染性法氏囊病病毒（IBDV）;感染性克隆;病毒拯救;核酶

基金资助：国家自然科学基金青年基金(32202793);北京市农林科学院创新能力建设(KJCX20230424);北京市农林科学院创新能力建设(KJCX20240338)