奶牛源肺炎克雷伯菌和溶血性曼氏杆菌的分离鉴定与致病性分析

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第2期北京时间：

作者：张随, 程纯结, 杨纯, 陈梦娇, 程晶, 周林宜, 李永清, 王小莺, 刘文晓

单位：1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京 1000972.新疆农业大学动物医学学院，乌鲁木齐 8300523.江西农业大学动物科学技术学院，南昌 3300004.北京农学院动物科技学院，北京 1022065.英国帕布莱特研究所，沃金 GU240 NB

摘要：目的 鉴定引起奶牛死亡的原因，为多病原混合感染导致奶牛疾病的防治提供参考。 方法 采用平板划线法分离培养死亡奶牛乳样和血样中的病原菌，经细菌分离培养、革兰染色、16S rRNA序列分析、毒力基因鉴定等对分离株进行种属鉴定，利用纸片扩散法测定其对抗菌药的敏感性，通过动物试验进行分离株的致病性评价。 结果 乳样中细菌分离株在麦康凯培养基上呈湿润粉红色菌落的革兰阴性短杆菌。16S rRNA序列分析结果显示，分离菌与GenBank中克雷伯菌属代表菌株的序列相似性>99%，与肺炎克雷伯菌标准株ATCC 13883聚于同一分支，鉴定为肺炎克雷伯菌，将其命名为BJ-B004。毒力基因检测结果表明，该分离株含有7种毒力基因，包括fimH、uge、wabG、ureA、entB、mrkD和ycf。药敏试验结果表明，其对链霉素、青霉素、阿莫西林、氨苄西林、复方新诺明耐药，对恩诺沙星、多西环素、氟苯尼考、四环素、大观霉素、头孢哌酮等抗菌药敏感。在该死亡奶牛的血样中分离出1株具有溶血特性的革兰阴性、两端钝圆的小杆菌，多呈单个或成对排列，瑞氏-吉姆萨复合染色呈两级浓染。16S rRNA序列分析结果显示，其与曼氏杆菌菌株序列相似性>98%，与牛源曼氏杆菌菌株ZY190616聚于同一分支，鉴定为溶血性曼氏杆菌，将其命名为BJ-B007。药敏试验结果表明，其对除庆大霉素外的抗菌药均不耐药。将肺炎克雷伯菌、溶血性曼氏杆菌以及混合菌液以3×107 CFU的剂量分别感染5只BALB/c小鼠，同时设PBS空白对照组（5只）结果显示，所有攻毒组小鼠均出现发病症状。48 h内混合感染组小鼠全部死亡，溶血性曼氏杆菌组死亡4只，肺炎克雷伯菌组死亡1只。病理学检查显示，溶血性曼氏杆菌引起肝脏、脾脏、肺脏、肾脏等多器官严重充血、出血及坏死病变。 结论 本研究从死亡奶牛的病料中分离到1株具有多重耐药性的肺炎克雷伯菌及1株具有高致病性的溶血性曼氏杆菌，该奶牛死亡原因为肺炎克雷伯菌感染引起乳房炎，继发条件致病菌溶血性曼氏杆菌感染引起菌血症，本研究结果为奶牛乳房炎和呼吸道综合征的联合诊断与综合防控提供科学依据。

关键词：奶牛;肺炎克雷伯菌;溶血性曼氏杆菌;分离鉴定;致病性

基金资助：北京市自然科学基金面上项目(6232012);国家自然科学基金面上项目(32172818);家畜产业技术体系北京市创新团队项目(BAIC06-2025);北京市乡村振兴农业科技(NY2502190125)