《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:黄欣欣, 翁成桢, 陈志安, 何敏嘉, 章蓓雯, 李鸿喜, 陈洪博, 李晓冰, 刘燕辉, 邱龙新
单位:1.福建农林大学动物科学学院,福州 3500022.福建省预防兽医学与兽医生物技术重点实验室,龙岩 3640003.龙岩学院生命科学学院,龙岩 364000
摘要:目的 本研究运用网络药理学与分子对接技术,揭示鬼针草治疗猪肠道炎症的机理,为其作为绿色兽药替代抗生素提供理论依据。 方法 从TCMSP数据库获取鬼针草的有效活性成分;整合GeneCard、NCBI和OMIM数据库中猪肠道炎性相关靶点信息;绘制药物与疾病靶点的韦恩图,并建立共有靶点的蛋白互作网络,对共有靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。通过STRING数据库筛选核心靶点,并运用AutoDock 1.5.7完成分子对接。为进一步验证上述结果,建立脂多糖(LPS)诱导的猪肠道上皮细胞炎症模型,并通过实时荧光定量PCR检测核心靶点mRNA表达水平。 结果 从TCMSP数据库筛选出4种鬼针草有效活性成分木犀草素、金鸡菊甙、(R)-2-(3, 4-二羟基苯基)-6, 7-二羟基苯并呋喃-3(2H)-one、槲皮素,并鉴定出与之相关的215个靶点基因。结合疾病数据库,共获得974个与猪肠道炎症相关的潜在靶点,通过筛选分析最终确定了28个核心靶点,其中包括4个关键核心靶点AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β。GO功能富集分析共鉴定出327个生物过程、27个细胞组分和60个分子功能条目,揭示了鬼针草可能参与多层次生物学过程。KEGG通路分析结果显示,共获得154条显著富集的信号通路,其中cAMP信号通路、转化生长因子-β(TGF-β)信号通路和PPAR信号通路与猪肠道炎症具有较强相关性。分子对接结果显示,鬼针草有效活性成分与核心靶点具有较强的结合能力。成功建立LPS诱导的猪肠道上皮细胞炎症模型,实时荧光定量PCR验证结果显示,与LPS组相比,鬼针草能下调猪肠道上皮细胞白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF)等关键靶点的表达水平。 结论 综合网络药理学预测、分子对接及体外细胞试验,本研究系统揭示了鬼针草抗猪肠道炎症的作用机制,其核心在于通过靶向IL-6、TNF-α等关键因子,进而调控cAMP、TGF-β等相关信号通路,形成一个多靶点、多通路的协同调控网络,从而发挥抗炎作用。
关键词:猪肠道炎症;网络药理学;鬼针草;分子对接
基金资助:福建省科技厅高校产学研合作项目(2023N5009);福建省自然科学基金面上项目(2025J011023)