《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:郭月菊, 尹庆宇, 赵梓硕, 乔文龙, 孙红祥, 李定刚
单位:1.河北农业大学动物医学院/中兽医学院,保定 0715002.保定冀中药业有限公司,保定 0715003.河北省中兽药技术创新中心,保定 0711004.浙江大学动物科技学院,杭州 310058
摘要:目的 探讨牛至提取散(HOEP)及其挥发性标识成分百里香酚(Thy)和香荆芥酚(Car)以及水溶性标识成分迷迭香酸(RA)、绿原酸(CA)和原儿茶酸(PA)的体内外抗炎作用。 方法 取对数生长期RAW264.7细胞,用不同浓度HOEP(200、400、800、1 000、1 200和1 600 μg/mL)及其有效成分(20、40、80、100、120和160 μg/mL)处理细胞,采用CCK-8法测定细胞存活率筛选确定供试药物的最大无毒剂量和最大供试浓度。利用脂多糖(LPS)构建RAW264.7细胞炎症模型,将细胞分为8组,分别为空白对照组(NC)、模型组(MC)以及HOEP、Thy、Car、RA、CA和PA组,通过细胞存活率检测、细胞形态观察、一氧化氮(NO)释放水平测定,以及细胞炎性因子含量检测,评价HOEP、Thy、Car、RA、CA和PA的体外活性。通过λ-角叉菜胶构建BALB/c小鼠足趾肿胀模型,将小鼠分为9组,分别NC、MC、HOEP、Thy、Car、RA、CA、PA和阿司匹林(ASA)组,测定足趾容积并计算足趾肿胀度,采用HE染色观察小鼠足趾组织病理学变化,通过ELISA法检测血清炎性因子含量,评价HOEP、Thy、Car、RA、CA和PA的体内活性。 结果 根据最大无毒剂量,结合操作实际,最终确定HOEP的最大供试浓度为1 000 μg/mL,Thy、Car、RA、CA和PA的最大供试浓度均为100 μg/mL。体外试验发现,与MC组相比,HOEP、Thy、Car、RA、CA和PA处理后,LPS诱导的RAW264.7细胞存活率、细胞中NO释放量和白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均显著降低(P<0.05)。体内试验发现,与MC组相比,HOEP、Thy、Car、RA、CA和PA组小鼠足趾颜色变化和肿胀程度均明显缓解;注射λ-角叉菜胶溶液2 h时HOEP、ASA、Thy、Car、RA和PA组小鼠足趾肿胀度均显著降低(P<0.05);4 h时HOEP、Thy、Car、RA和PA组小鼠足趾肿胀度均显著降低(P<0.05);6 h时ASA、HOEP、Thy、Car、RA、PA和CA组小鼠足趾肿胀度均显著降低(P<0.05)。病理学观察及血清学分析发现,与MC组相比,HOEP、ASA、Thy、Car、RA、CA和PA处理后,在一定程度上减少了λ-角叉菜胶致小鼠足趾肿胀发生时的淋巴细胞和粒细胞浸润,且小鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α含量均显著降低(P<0.05)。 结论 HOEP、Thy、Car、RA、CA和PA均能不同程度地抑制LPS诱导的细胞增殖分化、NO释放和炎性因子的分泌表达,能有效缓解小鼠足趾肿胀、足趾组织病理学损伤,并降低小鼠血清炎性因子含量,从而实现抗炎作用。本研究结果为HOEP的抗炎活性物质基础研究和作用机制阐释提供了参考。
关键词:牛至提取散;活性成分;炎症反应
基金资助:河北省自然科学基金资助项目(C2023204206);国家重点研发计划项目(2022YFD1801105-4);河北农业大学引进人才科研专项(YJ2023004)