《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析

miR-1343对猪卵泡颗粒细胞增殖与凋亡的影响及其转录调控分析

来源:中国畜牧兽医杂志2026年第3期北京时间:

作者:胡慧艳, 徐若若, 宋佳乐, 刘小辉

单位:1.邯郸学院特殊教育学院,邯郸 0560052.河北工程大学生命科学与食品工程学院,邯郸 056038

摘要:目的 miR-1343与动物生殖功能密切相关。试验旨在揭示miR-1343在猪卵泡颗粒细胞中的作用及SMAD4介导的转录调控机制。 方法 通过在体外分离培养的猪卵泡颗粒细胞中过表达miR-1343或抑制miR-1343,采用CCK-8法检测颗粒细胞增殖;利用实时荧光定量PCR检测颗粒细胞增殖和凋亡相关基因的表达水平;基于生物信息学分析和双荧光素酶报告试验预测并鉴定猪miR-1343启动子区;利用AnimalTFDB 4.0软件预测转录因子SMAD4与miR-1343启动子区的结合位点,并构建SMAD4基因结合突变位点的双荧光素酶报告载体(miR-1343-mut1和miR-1343-mut2)和SMAD4基因过表达载体(pcDNA3.1-SMAD4),探讨转录因子SMAD4对miR-1343启动子的调控作用。 结果 与mimics NC组相比,转染miR-1343 mimics可极显著降低颗粒细胞增殖能力(P0.05),而miR-1343-P3(-1 160/+100 bp)组启动子荧光素酶活性极显著升高(P0.05);与pcDNA3.1空载体组相比,过表达SMAD4基因后,miR-1343-mut1组启动子荧光素酶活性显著升高(P0.05)。 结论 miR-1343能够抑制猪卵泡颗粒细胞增殖并促进其凋亡,转录因子SMAD4通过结合miR-1343启动子区正向调控其转录。本研究结果为进一步探讨miR-1343在猪卵泡颗粒细胞中的调控机制提供了理论依据。

关键词:miR-1343;猪卵泡颗粒细胞;启动子;转录因子SMAD4

基金资助:河北省自然科学基金(C2022109010)

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