自拟中药方剂的抗炎作用及其机制研究

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第4期北京时间：

作者：张祖烽, 田薇, 张梦洁, 孙悦龙, 王楠, 赵金华, 郑威, 周炜炜, 李秀梅

单位：1.中国农业科学院饲料研究所，农业农村部饲料生物技术重点实验室，北京 1000812.哈尔滨商业大学药学院，哈尔滨 1500763.天津科技大学生物工程学院，天津 300457

摘要：目的 基于体内外试验及网络药理学，探究自拟中药方剂（designed herbal formula，DHF）的抗炎作用及其机制，为其应用于畜禽炎症防控提供理论依据。 方法 取黄芪、茯苓、白术、山楂，以2∶1∶2∶1比例置于容器中，经浸泡、煎煮、过滤、浓缩、冷冻干燥得DHF冻干粉。将DHF作用于小鼠巨噬细胞RAW264.7，采用细胞毒性试验法和乳酸脱氢酶释放法检测细胞活力，确定DHF安全浓度。基于脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7细胞炎症模型，通过实时荧光定量PCR检测DHF对炎症因子一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β和炎症反应关键酶环氧化酶-2（COX-2）、一氧化氮合酶（iNOS）表达量的影响；基于葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠结肠炎模型，考察DHF对小鼠疾病活动指数（DAI）、脾脏指数、组织病理学变化、结肠炎症因子表达量的影响，确定DHF的抗炎作用。通过网络药理学筛选DHF发挥抗炎作用的主要活性成分及其涉及的关键信号通路，并通过实时荧光定量PCR和Western blotting对关键信号通路和靶点进行验证。 结果 DHF在12.5~200 μg/mL浓度范围内对RAW264.7细胞活力及乳酸脱氢酶的释放无显著影响（P>0.05）。在LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型中，与模型组相比，DHF可剂量依赖性显著下调RAW264.7细胞NO含量及炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达水平（P<0.05），同时显著降低炎症反应关键酶COX-2与iNOS mRNA表达水平（P<0.05）。在DSS诱导的结肠炎小鼠模型中，与模型组相比，DHF能显著降低小鼠DAI（P<0.05），改善结肠组织的病理学损伤，显著下调结肠内炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA表达水平（P<0.05），表现出良好的抗炎作用。网络药理学预测结果显示，DHF的主要活性成分为槲皮素、山柰酚、异鼠李素、常春藤皂苷元等，且TNF及其下游核因子κB（NF-κB）信号通路可能是其发挥抗炎作用的核心通路。进一步试验证实，DHF可抑制RAW264.7细胞及小鼠结肠组织中TNF及其下游NF-κB信号通路关键靶点的mRNA与蛋白表达。 结论 自拟中药方剂DHF能通过抑制TNF-α/NF-κB信号通路的过度激活，有效抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症反应，缓解DSS诱导的小鼠结肠炎。

关键词：自拟中药方剂（DHF）;炎症;结肠炎;网络药理学

基金资助：中国农业科学院科技创新工程(CAAS-ASTIP-2024-IFR-1);中国农业科学院科技创新工程(CAAS-IFR-JCCX-2024-03)