黑龙江林蛙HSP90AB1基因克隆及脂多糖诱导下的组织表达分析

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第4期北京时间：

作者：刘雪枫, 陈兆东, 李昊熹, 张会新, 刘玉芬

单位：1.哈尔滨师范大学生命科学与技术学院，哈尔滨 1500252.黑龙江护理高等专科学校，哈尔滨 1500863.东北师范大学生命科学学院，长春 130024

摘要：目的 探究黑龙江林蛙（Rana amurensis）热休克蛋白90α家族B类成员1（heat shock protein 90 alpha class B member 1，HSP90AB1）基因的序列特征，了解其组织表达特性和脂多糖（LPS）诱导下的表达变化。 方法 以黑龙江林蛙脾脏组织cDNA为模板，通过PCR扩增HSP90AB1基因完整编码区（CDS）序列，使用在线软件对其编码蛋白进行生物信息学分析；利用实时荧光定量PCR和Western blotting检测生理状态下HSP90AB1基因在黑龙江林蛙皮肤、肌肉、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和胃等组织器官中的表达量，同时对LPS诱导下不同时间点HSP90AB1基因在不同组织器官的转录水平进行检测。 结果 黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS长2 178 bp，共编码725个氨基酸。生物信息学分析显示，HSP90AB1蛋白不存在信号肽且无跨膜信号，属于非跨膜蛋白，存在62个潜在磷酸化位点（含33个丝氨酸、19个苏氨酸及10个酪氨酸位点），其二级结构以α-螺旋为主（占47.03%），其次为无规则卷曲（占39.59%）和延伸链（占13.38%）。系统进化树结果显示，黑龙江林蛙与欧洲林蛙亲缘关系最近。在生理状态下，HSP90AB1基因在黑龙江林蛙胃中表达量最高，且显著高于其他组织（P<0.05）；在肌肉组织中表达量最低，且显著低于其他组织（P<0.05）。Western blotting结果显示，HSP90AB1蛋白在黑龙江林蛙胃中表达量最高；在心脏中表达量最低，且显著低于其他组织（P<0.05）。LPS诱导后，黑龙江林蛙各组织中HSP90AB1基因表达量随诱导时间延长而呈降低趋势，其中诱导72和96 h表达量均显著低于其他时间点（P<0.05）；诱导12、72 h时脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织（P<0.05）；24 h时肌肉和脾脏中HSP90AB1基因表达量显著高于其他组织（P<0.05）。 结论 本研究成功克隆了黑龙江林蛙HSP90AB1基因CDS区序列，并明确了其在不同组织中的表达规律，其中在胃中表达量最高，肌肉组织中表达量最低。LPS诱导可明显抑制HSP90AB1基因在黑龙江林蛙不同组织中的转录水平。本试验结果为深入探究HSP90AB1基因在林蛙生理及应激过程中的功能机制提供了理论依据。

关键词：黑龙江林蛙;HSP90AB1基因')">HSP90AB1基因;脂多糖;生物信息学;组织表达

基金资助：黑龙江省自然科学基金联合引导项目(LH2021C053)