甜茶树苷F对RAW264.7巨噬细胞M1型极化的作用研究

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第4期北京时间：

作者：孙伟翔, 孙逸凡, 孔明浩, 杨佳佳, 秦枫, 张力, 周末, 吴植, 朱善元

单位：1.江苏农牧科技职业学院，泰州 2253002.江苏省兽用生物制药高技术研究重点实验室，泰州 2253003.江苏现代畜牧与新兽药工程技术中心，泰州 2253004.常州大学应用技术学院，常州 2131645.泰州学院药学院，泰州 225300

摘要：目的 以脂多糖（LPS）和γ-干扰素（IFN-γ）诱导RAW264.7细胞M1型极化为细胞模型，探讨甜茶树苷F（CyF）对RAW264.7细胞M1极化的影响。 方法 通过MTT法检测不同浓度CyF（0、2、4、8、16、32、64 μmol/L）对细胞活力的影响，确定安全浓度范围。将细胞分为空白对照组（CON）、模型组（LPS+IFN-γ）及CyF给药组（4、8、16 μmol/L）。除CON组外，其余各组均用LPS（100 ng/mL）与IFN-γ（2.5 ng/mL）共刺激24 h建立炎症模型。通过Griess法来检测细胞上清液中的一氧化氮（NO）的含量；使用白光显微镜观察细胞形态；通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-10和转化生长因子-β（TGF-β）分泌量；采用Western blotting检测各组细胞样品磷酸化核转录因子-κB（p-p65）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶-1（Arg-1）的蛋白表达水平；采用免疫荧光（IF）法观察iNOS、Arg-1的荧光表达强度；采用实时荧光定量PCR法检测iNOS、Arg-1基因表达情况。 结果 MTT试验表明，与CyF0组的细胞活力相比，CyF4、CyF8和CyF16组的细胞活力显著增加（P<0.05），故4~16 μmol/L CyF为细胞培养的最适浓度。与LPS+IFN-γ组相比，各CyF给药组RAW264.7细胞上清液中NO的释放量均显著降低（P<0.05），且细胞的伪足伸长等极化形态得到改善；CyF4、CyF8和CyF16组细胞上清液中TGF-β的分泌量显著升高（P<0.05），CyF8和CyF16组细胞上清液中的IL-10的分泌量显著升高（P<0.05）；CyF4、CyF8和CyF16组细胞上清液中的TNF-α显著降低（P<0.05），CyF8和CyF16组细胞上清液中IL-6的生成量显著降低（P<0.05）；CyF4、CyF8和CyF16组细胞p-p65和iNOS的蛋白表达量、iNOS/DAPI的荧光强度比值及其基因的相对表达量显著下调（P<0.05），Arg-1的蛋白表达量、Arg-1/DAPI的荧光强度比值及其基因的相对表达量显著上调（P<0.05）。 结论 CyF在4~16 μmol/L浓度范围内能有效抑制LPS+IFN-γ诱导的RAW264.7细胞M1型极化，表现为降低NO、TNF-α、IL-6、iNOS及p-p65水平；同时促进M2型极化，表现为升高TGF-β、IL-10及Arg-1表达。CyF可能通过调控核因子-κB（NF-κB）信号通路及巨噬细胞表型转化发挥抗炎作用，具备作为抗炎药物先导化合物的开发潜力。

关键词：炎症反应;甜茶树苷F;RAW264.7巨噬细胞;巨噬细胞极化;表型转化

基金资助：江苏省高等学校基础科学（自然科学）研究重大项目(21KJA230001);江苏省重点研发计划（现代农业）(BE2020407);2023年江苏省高校协同创新中心项目(00000223001);江苏省高等学校自然科学基金(23KJB230002);泰州市科技支撑项目（农业）(TN202314)