miR-153-3p/KLF5轴对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第4期北京时间：

作者：赵梅曼, 张立春, 李成萍, 周文皓, 于元元, 周国利

单位：1.聊城大学农业与生物学院，聊城 2520002.吉林省农业科学院动物生物技术研究所，公主岭 136100

摘要：目的 研究miR-153-3p/KLF5轴在3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的功能及作用机制。 方法 采用鸡尾酒诱导法诱导3T3-L1前脂肪细胞成脂分化，并收集诱导分化第0、2、4、6和8天细胞，利用实时荧光定量PCR检测不同分化时期细胞中miR-153-3p相对表达量；将miR-153-3p模拟物（mimics）、抑制物（inhibitor）和阴性对照（NC）分别转染3T3-L1细胞并诱导成脂分化，通过油红O染色观察脂滴形成情况，利用实时荧光定量PCR检测成脂标志基因CAAT增强子结合蛋白α（C/EBPα）、C/EBPβ、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）和脂肪酸结合蛋白4（FABP4）相对表达量，同时采用Western blotting检测成脂标志基因的蛋白表达水平；利用TargetScan在线网站预测miR-153-3p靶基因，比对候选靶基因的3'-非翻译区（3'-UTR）与miR-153-3p结合位点在不同物种间的序列保守性。分别将miR-153-3p mimics、NC与双荧光素酶报告基因质粒psiCHECK-2的重组体（WT-3'-UTR和Mut-miR153）共转染HEK293T细胞，利用双荧光素酶报告基因试验检测miR-153-3p与KLF5基因的靶向关系。同样地，分别将miR-153-3p mimics、NC与pCMV质粒重组体（WT-KLF5和Mut-KLF5-153）共转染HEK293T和3T3-L1细胞，利用Western blotting检测KLF5蛋白表达水平。 结果 在3T3-L1细胞成脂过程中，与诱导分化第0天相比，诱导分化第2、4、6和8天细胞中miR-153-3p相对表达量显著或极显著降低（P0.05）。miR-153-3p mimics与KLF5基因共转染试验结果显示，与NC组相比，mimics组细胞中WT-KLF5蛋白表达水平极显著下调（P0.05）。 结论 miR-153-3p可通过下调KLF5基因的表达进而抑制3T3-L1细胞的成脂分化。

关键词：miR-153-3p;KLF5基因')">KLF5基因;3T3-L1前脂肪细胞;成脂分化

基金资助：山东省自然科学基金(ZR2023MC102);科技创新2030-重大项目(2023ZD0404803);聊城大学畜牧学学科开放课题(319312105-30);国家自然科学基金(31571274)