基于网络药理学和分子对接技术探究黄芪抑制奶牛乳腺炎的抗炎机制

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第5期北京时间：

作者：李英, 辛杰, 马文妍, 丁涛, 杜军

单位：1.宁夏大学生命科学学院，银川 7500212.宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室，银川 750021

摘要：目的 基于网络药理学、分子对接技术挖掘黄芪抑制奶牛乳腺炎的主要靶点，进一步通过体外细胞试验探究其可能作用机制。 方法 通过TCMSP数据库检索黄芪的活性成分及相应靶点，运用GeneCards和OMIM数据库查询奶牛乳腺炎的相关靶点，并导入Vene平台进行映射获取预测靶点；运用STRING数据库和Cytoscape v 3.10.2软件构建蛋白互作（PPI）网络图，确定关键靶点；利用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析；采用分子对接技术对黄芪活性成分和关键靶点进行半柔性对接，并通过结合能分析对接效果。最后，用CCK-8法测定黄芪对奶牛乳腺上皮细胞（MAC-T）的影响，利用脂多糖（LPS）诱导MAC-T细胞构建体外炎症模型，利用实时荧光定量PCR检测炎症靶点、相关信号通路及炎症相关因子表达。 结果 成功筛选出17种黄芪活性成分及185个作用靶点，经PPI网络分析得到IL-6、TNF、MMP9、IL-1β和ESR1共5个关键靶点。GO功能富集分析显示，生物过程显著富集条目包括生殖细胞的正向调控、免疫反应等；细胞组分中显著富集条目主要集中在细胞外间隙、细胞外区域等；分子功能中显著富集条目集中在细胞因子活性、锌离子结合等。KEGG通路富集分析表明，黄芪关键靶点显著富集于IL-17信号通路、PI3K-Akt信号通路、AGE-RAGE信号通路等，其中IL-17信号通路是核心通路。细胞试验显示，与LPS组相比，90 μg/mL黄芪提取物处理后MAC-T细胞中关键炎症靶点基因IL-6、MMP9、IL-1β和TNF-α表达量显著降低（P<0.05），ESR1基因表达量显著升高（P<0.05）；IL-17信号通路关键因子IL-17A、IL-17RA、TRAF6和ACT1基因表达量均显著降低（P<0.05）。 结论 黄芪通过槲皮素、山柰酚等主要活性成分作用于IL-6、MMP9、IL-1β等靶点，调控IL-17、PI3K-Akt等信号通路从而抑制奶牛乳腺炎。本研究结果为临床奶牛乳腺炎的防治提供了参考。

关键词：奶牛乳腺炎;黄芪;网络药理学;分子对接;奶牛乳腺上皮细胞

基金资助：宁夏自然科学基金项目(2024AAC03118);国家自然科学基金项目(32160044)