《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:吕蕊雪, 肖莹, 麦多, 彭啟敏, 包莹莹, 潘娟, 谭嘉诚, 潘雨涵, 王金泉
单位:1.新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐 8300522.新疆草食动物新药研究与创制重点实验室,乌鲁木齐 830052
摘要:目的 探究从养殖场污水中分离纯化的大肠杆菌噬菌体生物学特性、全基因组特征及其对小鼠感染大肠杆菌的防治效果。 方法 以羊源大肠杆菌D15为宿主菌,采用双层琼脂平板法从污水混合样品中分离、筛选并纯化大肠杆菌噬菌体,通过透射电镜观察噬菌体形态;进一步测定噬菌体裂解谱、最佳感染复数(MOI)、一步生长曲线、热稳定性、酸碱耐受性和氯仿敏感性;基于全基因组测序分析噬菌体的遗传特征;采用体外、体内试验评估噬菌体抑菌效果。 结果 从污水中分离得到1株大肠杆菌噬菌体,命名为vB_EcoM_D15,该噬菌体具有透明且边缘清晰无晕环的噬菌斑。噬菌体vB_EcoM_D15可特异性地对部分大肠杆菌产生裂解作用,其MOI为0.01,潜伏期为10 min,爆发期为70 min,裂解量为16 PFU/cell;在4~70 ℃和pH 3.0~12.0环境下均能保持活性,对氯仿敏感。全基因组分析表明,噬菌体vB_EcoM_D15基因组全长52 949 bp,GC含量为44.1%,不含耐药、毒力和溶原性相关基因;基因组共包含76个开放阅读框(ORFs),其中38个具有明确功能。体外抑菌试验结果显示,在0~10 h内,噬菌体vB_EcoM_D15能够有效抑制宿主菌生长;体内保护试验结果表明,大肠杆菌攻毒组小鼠全部死亡,噬菌体治疗和预防组小鼠存活率分别为90%和80%。 结论 本研究分离筛选得到1株大肠杆菌烈性噬菌体,其生物学特征明确,不携带毒力、耐药和溶原性相关基因,体内外抑菌效果良好。本研究结果为噬菌体防治耐药大肠杆菌感染提供了理论依据。
关键词:噬菌体;大肠杆菌;生物学特性;全基因组分析
基金资助:国家自然科学基金(32360868);新疆自治区自然科学基金(2025D01D16);“新疆草食动物新药研究与创制”重点实验室2024开放课题(XJCDVM-HDRC-S202416)