《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:梁玥, 李克欣, 于江, 曾昊, 张玉玉, 丁罗刚, 刘飞, 陈智, 孙文博, 吴家强, 刘宇, 李建达
单位:1.黑龙江八一农垦大学,大庆 1633192.山东省农业科学院畜牧兽医研究所,农业农村部畜禽生物组学重点实验室,济南 250100
摘要:目的 从临床典型病例分离鉴定猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV),分析流行毒的遗传进化及致病性,为山东地区PRRSV防控提供参考。 方法 将研磨后的PRRSV阳性肺脏组织上清接种于非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145)分离病毒,通过间接免疫荧光试验和透射电镜鉴定分离毒株,对分离毒株进行全基因组测序和遗传进化分析,同时评价分离毒株对30日龄仔猪的致病性。 结果 PRRSV阳性肺脏组织上清盲传3代后感染Marc-145细胞,感染48 h后Marc-145细胞出现收缩、变圆、聚集等明显的细胞病变。间接免疫荧光试验发现,接毒24 h后在细胞中形成明显的簇状荧光。通过透射电镜在胞质囊泡中观察到直径为50~60 nm的病毒粒子,与PRRSV结构大小一致,证实分离获得1株PRRSV毒株,毒价为105.65 TCID50/mL,并命名为CH-SDTA-2501。通过全基因组测序测得分离株基因组全长15 001 bp。经遗传进化和重组分析发现,该毒株与NADC30毒株处于同一分支,为NADC30与JXA1毒株的重组毒株。通过喷鼻和肌内注射途径分别感染1×105.0 TCID50 CH-SDTA-2501毒株3 d后,仔猪开始出现咳嗽、气喘等呼吸症状,并在血清中检测到病毒的存在,在感染14 d后剖检可见肺叶实变、间质增粗,组织病理学观察发现肺泡间隔增厚、上皮细胞增生。 结论 本研究成功分离了1株类NADC30 PRRSV毒株,该毒株能引起仔猪出现明显的呼吸系统症状,为PRRSV的防控提供了新信息。
关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV);NADC30;分离鉴定;遗传进化;致病性
基金资助:国家自然科学基金(32402881);山东省现代农业产业技术体系(SDAIT-08);济南市新高校20条(202333065);山东省农业科学院农业科技创新工程(CXGC2025F09);山东省农业科学院农业科技创新工程(CXGC2025C10);泰山学者工程资助项目