产气荚膜梭菌噬菌体裂解酶分泌表达及其抑菌增效研究

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第5期北京时间：

作者：吴立婷, 黄偲偲, 朱宁, 包红朵, 余祖功, 王冉, 张辉

单位：1.南京农业大学，南京 2100952.江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所，江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地，南京 2100143.江苏大学食品与生物工程学院，镇江 212013

摘要：目的 利用枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis， B. subtilis）表达产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens， Cp）噬菌体裂解酶LysCP72，分析裂解酶活性、抑菌效果及其在提升家禽生长性能、肠道抑菌效果中的应用潜力，为研发预防Cp感染的新型抗菌产品提供重要支撑。 方法 鉴定Cp噬菌体裂解酶基因并连接于表达载体p43NMK，转化枯草芽孢杆菌168构建重组枯草芽孢杆菌B. subtilis-LysCP72，明确裂解酶表达活性及体外抑菌作用。将90只1日龄肉鸡（公母混养）随机分为3组：B. subtilis-LysCP72组、B. subtilis-p43NMK组和对照组，每组3个重复，每个重复10只鸡。B. subtilis-LysCP72和B. subtilis-p43NMK组分别在100 mL饮水中添加1 mL 1010 CFU/mL重组枯草芽孢杆菌和空载菌原液，于2 h内饮完，对照组肉鸡饲喂基础饲粮及正常饮水，连续饲喂14 d。分析各组肉鸡料重比，测定盲肠Cp菌落数，观察肠道形态结构。 结果 重组构建的裂解酶序列与预期相符，重组枯草芽孢杆菌B. subtilis-LysCP72在上清液及菌体均可表达裂解酶产物，浓缩上清液作用10 min，Cp菌液D600 nm值由约1.00降至0.62，裂解效果与浓度呈正相关。在动物试验中，口服B. subtilis-LysCP72 14 d后，与空载菌B. subtilis-p43NMK相比，肉鸡体重增加13.87%（P<0.05），料重比降低14.55%（P<0.05），肠道内Cp的载菌量降低1.58 lg CFU/g（P<0.01）。肉鸡肠道组织及切片结果显示，其形态结构均无病理变化，连续口服重组枯草芽孢杆菌B. subtilis-LysCP72能显著提高肉鸡十二指肠、空肠和回肠绒毛高度和绒/隐比（P<0.05）。 结论 Cp噬菌体裂解酶在枯草芽孢杆菌中能有效表达并能在肠道中抑制Cp增殖，且无副作用，本研究结果为裂解酶在抑菌与促生长方面的产品化应用指明了方向。

关键词：产气荚膜梭菌;噬菌体裂解酶;重组枯草芽孢杆菌;肉鸡;抑菌作用

基金资助：国家重点研发计划项目(2024YFE0198800);江苏省科技创新支撑计划项目(BZ2023004)