基于miRNA测序解析不同季节苏尼特羊肝脏脂质代谢变化

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第5期北京时间：

作者：赵敏, 常龙维, 訾艳芸, 王琳, 周欣宇, 孟凡华

单位：1.内蒙古农业大学生命科学学院，内蒙古自治区生物制造技术重点实验室，内蒙古地区特色家畜生物技术创新团队，呼和浩特 0100112.阿尔泰国立农业大学生物技术学院，巴尔瑙尔 656049

摘要：目的 揭示苏尼特羊肝脏组织中微小RNA（miRNA）在季节性寒冷适应中潜在的脂肪代谢调控机制。 方法 对采自冬季和夏季的苏尼特羊肝脏组织进行miRNA测序，利用生物信息学方法筛选差异表达miRNA，并对其进行靶基因预测。对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析，构建差异表达miRNA与靶基因调控网络，筛选出关键miRNA和靶基因，并构建含靶位点的野生型载体和突变型载体。将关键miRNA与靶基因载体共转染HEK-293T细胞，通过双荧光素酶报告基因试验检测荧光素酶活性；将miRNA模拟物（mimics）和抑制剂（inhibitor）分别转染至苏尼特羊胎儿肾髓质细胞进行过表达和干扰试验，通过实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测靶基因mRNA和蛋白表达水平。 结果 从冬、夏两季采集的肝脏组织测序数据中共筛选出14个差异表达miRNA，其中3个miNRA表达上调、11个miRNA表达下调。差异表达miRNA靶基因主要参与胰岛素信号、HIF-1信号等产能产热通路。通过差异表达miRNA与靶基因调控网络筛选出关键miRNA（miR-380-3p）和其靶基因CPT1A。CPT1A基因野生型载体和miR-380-3p共转染细胞后，双荧光素酶活性显著低于CPT1A基因野生型载体和阴性对照共转染组（P0.05）。实时荧光定量PCR结果表明，miR-380-3p mimics组细胞中CPT1A基因表达量显著低于mimics NC组（P0.05）。Western blotting结果表明，过表达miR-380-3p后细胞中CPT1A蛋白表达量显著降低（P<0.05），抑制miR-380-3p后CPT1A蛋白表达量显著升高（P<0.05）。 结论 冬季苏尼特羊肝脏组织可通过miR-380-3p靶向CPT1A基因参与脂质代谢。本研究结果为绵羊品种选育提供了理论支撑，也为绵羊季节性寒冷适应机制研究提供了参考。

关键词：苏尼特羊;肝脏;转录组;微小RNA;脂质代谢

基金资助：内蒙古自治区自然科学基金项目(2025MS03132);内蒙古自治区科技计划项目(2025KYPT0100);内蒙古自治区研究生科研创新项目(KC2024029S)