《中国畜牧兽医杂志》发表论文赏析
作者:何宁, 黄歆如, 华永丽, 马伟东, 孔祥颖, 石红梅
单位:1.甘肃农业大学,兰州 7300002.陕西农牧良种场,宝鸡 7222003.青海海北畜牧兽医科学研究所,海北 8122004.甘肃甘南畜牧兽医工作站,甘南 747000
摘要:目的 在有呼吸道症状的病牛鼻拭子样本中分离鉴定金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),分析其生物学特性,为防控牛呼吸道综合征提供依据。 方法 无菌采集具有呼吸道症状的成年牛鼻拭子,经血琼脂平板上划线培养后挑取优势菌落进行纯化;采用菌落形态学观察、生化鉴定、16S rRNA基因序列比对及特征基因PCR鉴定确定菌属;测定分离菌生物被膜形成能力,通过药敏试验、耐药基因及毒力基因检测研究其生物学特性,采用腹腔注射和滴鼻两种方式探究其对小鼠的致病性。 结果 分离菌在血平板上呈现β-溶血环且革兰染色观察到葡萄状排列的阳性球菌。生化鉴定结果显示,分离菌果糖、乳糖、甘露糖、麦芽糖、蕈糖、甘露醇和VP试验等为阳性;蔗糖、木糖、山梨醇等为阴性。16S rRNA测序分析显示,分离菌与NCBI登录的金黄色葡萄球菌相似性均在99%以上,并扩增出金黄色葡萄球菌16S rRNA基因,但未扩增出mecA基因,表明分离菌为非耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。分离菌具有中等生物被膜形成能力。其对复方新诺明、强力霉素耐药,对头孢噻肟、四环素、卡那霉素、红霉素、林可霉素、阿莫西林、环丙沙星、头孢西丁等18种药物敏感。分离菌携带tet(38)、mepA、mepR、mgrA、arlS、arlR耐药基因及hla、hlb、fnbA、fnbB、clfA、clfB、coa、spa、sspa、nuc毒力基因,未发现sea、sec、seh、eta、etb、tsst毒力基因。致病性试验结果显示,分离菌腹腔注射及滴鼻感染对小鼠的半数致死量(LD50)分别为1.74×107和8.37×107 CFU/只。感染组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植且造成不同程度的炎性细胞浸润和细胞坏死,其中腹腔注射攻毒组以肝脏损伤为主,滴鼻攻毒组损伤主要集中在肺脏。 结论 本研究分离到1株牛呼吸源金黄色葡萄球菌,该菌携带多种耐药基因及毒力基因,且具有一定的致病力,为后续研究其致病机制、防控方案等提供了理论依据。
关键词:金黄色葡萄球菌;分离鉴定;生物学特性;致病性
基金资助:财政部和农业农村部国家现代农业产业技术体系项目(CARS-37);甘肃农业大学伏羲杰出人才培育计划(Gaufx-03J01);甘肃省科技厅重点研发项目(24YFNA016);甘肃省现代寒旱特色农业科技支撑项目(KJZC-2025-14)