靶向金黄色葡萄球菌Ⅶ型分泌系统FHA结构域的抑制剂筛选

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第6期北京时间：

作者：何小强, 刘盼盼, 王静鸽, 王伊璐, 陈昊蓉, 王建崇, 王桂琴

单位：宁夏大学动物科技学院，银川 750021

摘要：目的 筛选并验证靶向金黄色葡萄球菌Ⅶ型分泌系统（T7SS）中EssC蛋白FHA结构域的天然小分子，为开发新型抗菌药物提供先导化合物。 方法 通过同源建模构建FHA结构域的三级结构模型，通过大规模虚拟筛选，从天然化合物库中获取候选小分子，制备高纯度的FHA重组蛋白。运用差示扫描荧光法（DSF）、内源性荧光淬灭及蛋白质红外光谱分析优选小分子与靶蛋白的直接结合及对靶蛋白构象的影响。通过分子对接与分子动力学模拟预测其原子水平的结合模式与稳定性，利用药物亲和反应靶点稳定性（DARTS）试验验证其在复杂体系中的靶向特异性。 结果 从天然化合物库中筛选出8个呈现高结合能的候选化合物，通过系列结合试验验证，鉴定出槐定碱与血根碱为FHA结构域的高亲和力配体。二者与FHA结构域结合均引起熔解温度提升（>2.0 ℃）及浓度依赖性的荧光淬灭效应。红外光谱分析表明，在2∶5摩尔比下，槐定碱与血根碱均可驱动FHA结构域发生β-转角向β-折叠的构象转化。分子对接与分子动力学模拟结果表明，槐定碱与血根碱在FHA结构域中形成空间构象与相互作用网络迥异的结合模式。DARTS试验证实，槐定碱与血根碱均能通过特异性结合有效稳定FHA结构域的空间构象，显著增强其抵抗蛋白酶降解的能力。 结论 槐定碱与血根碱是能特异性靶向金黄色葡萄球菌T7SS中EssC蛋白FHA结构域的潜在先导化合物。本研究不仅系统性地探索了以FHA结构域为靶点的抗菌策略，更为开发针对金黄色葡萄球菌T7SS的新型靶向抗菌先导化合物提供了试验依据与理论支持。

关键词：金黄色葡萄球菌;Ⅶ型分泌系统;虚拟筛选;FHA结构域

基金资助：国家自然科学基金项目(32460903)