乌骨鸡肝微粒体中7种细胞色素P450亚酶体外代谢恩诺沙星差异研究

来源：中国畜牧兽医杂志2026年第6期北京时间：

作者：栾梦晗, 刘洵, 孙志敏, 王郑雯, 张灵璇, 万凯, 贺利民, 刘戎, 李亚菲

单位：1.华南农业大学兽医学院，国家兽药残留基准实验室，广州 5106422.广东省农业科学院农业质量标准与监测技术研究所，广州 5106403.广东省农产品质量安全风险评估重点实验室，广州 5106404.农业农村部农产品质量安全风险评估重点实验室（广州），广州 510640

摘要：目的 探究乌骨鸡体内介导恩诺沙星代谢的细胞色素P450（CYP450）酶亚型，为阐明恩诺沙星在乌骨鸡体内消除缓慢的机制提供依据。 方法 采用钙离子沉淀法制备乌骨鸡肝微粒体，以恩诺沙星为反应底物，选择7种CYP450亚酶（CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP2C45、CYP2D6、CYP2E1和CYP3A4）的特异性化学抑制剂，建立肝微粒体体外代谢孵育体系，采用高效液相色谱法检测孵育前后恩诺沙星底物的剩余量，计算各抑制剂对CYP450亚酶的抑制率。在此基础上，设置不同浓度的特异性化学抑制剂处理，使用GraphPad Prism 10.0软件以抑制剂浓度为横坐标、抑制率为纵坐标绘图，采用非线性回归拟合计算各抑制剂对CYP450亚酶的半数抑制浓度（IC50），评估不同抑制剂对CYP450亚酶的抑制作用，筛选参与恩诺沙星代谢的CYP450亚酶。 结果 酮康唑（CYP3A4抑制剂）、二乙基二硫代氨基甲酸钠（CYP2E1抑制剂）、磺胺苯吡唑（CYP2C9抑制剂）、奎尼丁（CYP2D6抑制剂）、α-萘黄酮（CYP1A2抑制剂）、奥美拉唑（CYP2C45抑制剂）和氯吡格雷（CYP2B6抑制剂）对恩诺沙星代谢的抑制率分别为74.97%、59.93%、47.16%、35.26%、29.07%、24.82%和20.09%。IC50检测结果显示，酮康唑对CYP3A4的IC50为0.66 µmol/L，表现强抑制作用；二乙基二硫代氨基甲酸钠对CYP2E1、磺胺苯吡唑对CYP2C9的IC50分别为12.92和58.02 µmol/L，表现弱抑制作用；奎尼丁对CYP2D6、α-萘黄酮对CYP1A2、奥美拉唑对CYP2C45、氯吡格雷对CYP2B6的IC50分别为450.90、3 399、4 143和72 016 µmol/L，均无抑制作用。 结论 CYP3A4、CYP2E1和CYP2C9参与乌骨鸡肝微粒体中CYP450酶对恩诺沙星的代谢，其中CYP3A4呈现主要作用，CYP2E1、CYP2C9次之。本试验结果为深入研究恩诺沙星在乌骨鸡中代谢提供了数据参考。

关键词：乌骨鸡;恩诺沙星;肝微粒体;细胞色素P450;半数抑制浓度

基金资助：科技创新战略（农业科研主力军建设）“金颖之星”项目(R2023PY-JX012);国家农产品质量安全风险评估项目(GJFP2020004);国家农产品质量安全风险评估项目(14195200)